分子剋隆實驗指南-(上.中.下冊)-(原書第四版) 下載 mobi epub pdf 電子書 2025

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MR格林 著

圖書標籤:

• 分子剋隆
• 分子生物學
• 實驗指南
• 生物技術
• 基因工程
• 剋隆技術
• 生物科學
• 原書第四版
• 上中下冊
• 實驗室手冊

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齣版社： 科學

ISBN：9787030519979

商品編碼：12033654938

齣版時間：2017-03-01

基本信息

商品名稱： 分子剋隆實驗指南-(上.中.下冊)-(原書第四版)	齣版社： 科學齣版社	齣版時間：2017-03-01
作者：M.R.格林	譯者：賀福初	開本： 32開
定價： 598.00	頁數：	印次： 1
ISBN號：9787030519979	商品類型：圖書	版次： 1

內容提要

　　分子剋隆技術30多年來一直是全球生命科學領域實驗室專業技術的基礎。冷泉港實驗室齣版的《分子剋隆實驗指南》一書擁有的可靠性和*性，使本書成為業內*流行、*具影響力的實驗室操作指南。第四版的《分子剋隆實驗指南》保留瞭之前版本中備受贊譽的細節和準確性，10個原有的核心章節經過更新，反映瞭標準技術的發展和創新，並介紹瞭一些前沿的操作步驟。同時還修訂瞭第三版中的核心章節，以突齣現有的核酸製備和剋隆、基因轉移及錶達分析的策略和方法，並增加瞭12個新章節，專門介紹*激動人心的研究策略，包括利用 DNA 甲基化技術和染色質免疫沉澱的錶觀遺傳學分析、RNAi、新一代測序技術，以及如何處理數據生成和分析的生物信息學，例如介紹瞭分析工具的使用，如何比較基因和蛋白質的序列，鑒定多個基因的常見錶達模式等。本書還保留瞭必不可少的附錄：包括試劑和緩衝液、常用技術、檢測係統、一般安全原則和危險材料。任何使用分子生物學技術的基礎研究實驗室都將因擁有一冊《分子剋隆實驗指南》而受益。本書可作為學習遺傳學、分子細胞生物學、發育生物學、微生物學、神經科學和免疫學等學科的重要指導，可供生物學、醫藥衛生，以及農、林、牧、漁、檢驗檢疫等方麵的科研、教學與技術人員參考。

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　　Originally published i English as Molecular Cloning: A Laboratory Manual, Fourth Edition, by MichaelR.Gree and Joseph Sambrook ? 2012 Cold Spring Harbor Laboratory Press, Cold Spring Harbor, NewYork, USA? 2017 Science Press. Print iChina.Authorized Simplified Chinese translatio of the English editio? 2012 Cold Spring Harbor LaboratoryPress. This translatio is published and sold by permissio of Cold Spring Harbor Laboratory Press, the owner of all rights to publish and sell the same.

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《生物化學與分子生物學實驗技術：原理與實踐》 內容簡介： 本書匯集瞭當代生物化學與分子生物學領域最核心、最前沿的實驗技術，旨在為生命科學研究者、高校師生提供一套全麵、深入、可操作性強的實驗指導。全書結構嚴謹，內容詳實，覆蓋從基礎理論到高級應用的廣闊範圍，是理解和掌握現代生命科學實驗體係的必備參考書。 第一部分：生物分子基礎操作與分離純化技術 本部分聚焦於生物大分子（蛋白質、核酸、脂質）的提取、檢測與純化。我們詳細闡述瞭不同來源生物材料（組織、細胞、微生物）的預處理方法，強調瞭在保持分子活性前提下的有效破碎技術，如高壓勻漿、超聲波破碎和酶解法。 在蛋白質化學部分，詳細介紹瞭SDS-PAGE、非變性PAGE及等電聚焦電泳（IEF）的原理與操作細節，包括不同緩衝液體係的選擇、凝膠配製的技術要點，以及如何根據實驗目的選擇閤適的電泳遷移率分析方法。對於蛋白質的分離純化，我們深入解析瞭不同層析技術：包括基於分子大小的凝膠過濾層析（SEC）、基於電荷的離子交換層析（IEX）——重點討論瞭陰離子和陽離子交換的適用條件與洗脫梯度設計；以及基於特異性結閤的親和層析（AC），特彆是金屬離子螯閤親和層析（IMAC）在重組蛋白純化中的應用，包括標簽蛋白的引入、復性過程的控製。此外，本書還涵蓋瞭蛋白質的定量分析，如Bradford法、Lowry法以及紫外吸收法（A280nm），並提供瞭不同方法的優缺點對比分析。 核酸部分側重於DNA和RNA的提取、鑒定與質量控製。針對不同樣本（血液、植物組織、微生物菌液）的特點，提供瞭改良的酚-氯仿抽提法和基於矽膠膜的快速提取技術，並著重討論瞭如何有效去除RNA酶（RNase）的汙染，確保RNA的完整性。核酸的分析與純化部分，詳細介紹瞭瓊脂糖凝膠電泳的分辨率控製、分子量測定方法，以及利用梯度梯度凝膠或變性凝膠進行片段分析的技術。對於寡核苷酸的閤成與修飾，我們也進行瞭必要的理論介紹與實踐指導。 第二部分：分子生物學核心技術體係 本部分是全書的重點，係統介紹瞭現代分子生物學研究的基石技術。 聚閤酶鏈式反應（PCR）技術的闡述細緻入微，從引物設計原則（包括Tm值的精確計算、二級結構避免）開始，逐步深入到熱循環條件的優化。我們詳細區分瞭標準PCR、反轉錄PCR（RT-PCR）、定量實時PCR（qPCR，或稱Real-Time PCR）的技術流程。在qPCR部分，重點講解瞭染料法（如SYBR Green）和探針法（如TaqMan）的差異、標準麯綫的建立、以及溶解麯綫分析在特異性驗證中的重要性。 核酸雜交技術的原理與應用是另一大模塊。從經典的Southern Blotting（用於檢測DNA序列）和Northern Blotting（用於檢測RNA豐度）到熒光原位雜交（FISH），我們不僅描述瞭膜的選擇、標記物的製備，還強調瞭高敏感度檢測係統（如放射性標記、酶偶聯顯色或熒光標記）的實際操作要點。 基因剋隆與重組DNA技術是本捲的核心。詳細介紹瞭限製性內切酶的選擇與酶切反應的優化，連接酶（T4 DNA Ligase）的活性與操作環境控製。針對載體構建，我們全麵覆蓋瞭質粒載體、噬菌體載體、人工染色體載體（YAC/BAC）的特性，以及如何高效地將目標基因插入載體，包括粘性末端連接、平末端連接和同源重組剋隆技術。書中還收錄瞭構建特定文庫（如cDNA文庫、基因組文庫）的詳細步驟。 第三部分：蛋白質錶達、修飾與相互作用研究 本部分側重於將基因信息轉化為功能性蛋白質，並解析其在細胞內的行為。 蛋白質錶達係統的構建與優化是關鍵。我們對比分析瞭原核係統（大腸杆菌）、酵母係統、昆蟲細胞係統（Baculovirus）和哺乳動物細胞係統在錶達目標蛋白方麵的優勢與局限性。對於在大腸杆菌中錶達的包涵體蛋白，我們提供瞭係統的復性方案，包括去摺疊、稀釋復性、氧化復性等步驟的實驗參數調控。 蛋白質的定量與活性分析方麵，除瞭常規的ELISA（酶聯免疫吸附測定）技術外，本書還詳細介紹瞭用於高通量篩選的基於熒光或化學發光的方法。對於酶學研究，我們討論瞭反應動力學（Michaelis-Menten方程的應用）、Km和Vmax的測定，以及抑製劑篩選的實驗設計。 蛋白質相互作用研究是現代生物學的熱點。我們深入講解瞭酵母雙雜交（Y2H）係統的篩選策略、實驗對照的設置，以及如何將Y2H擴展到體外或體內係統（如Co-IP/Pull-Down實驗）。對於時空動態的相互作用研究，書中引入瞭BRET/FRET技術的基本原理和應用實例。 第四部分：細胞生物學與成像技術前沿 本部分將分子技術與細胞功能研究相結閤，重點介紹細胞水平的分析方法。 細胞培養與轉染技術是基礎。詳細描述瞭無菌操作規範、培養基的優化、常見細胞係（如HeLa, HEK293）的維持，以及轉染效率的評估。我們對比瞭脂質體介導、電穿孔法和病毒載體介導的轉染技術，並提供瞭針對難轉染細胞的優化建議。 免疫細胞化學分析是本捲的另一亮點。詳細闡述瞭免疫組化（IHC）和免疫熒光（IF）的染色步驟，包括抗原修復技術的選擇（熱修復與酶修復）、一抗/二抗的篩選與稀釋、封閉步驟的精確控製，以及熒光光譜的串擾避免。書中還包含瞭流式細胞術（FACS）的基本原理，用於細胞分群和凋亡/增殖的定量分析。 生物成像技術的介紹涵蓋瞭從基礎的明場/暗場顯微鏡到高級的共聚焦顯微鏡（Confocal Microscopy）。對於共聚焦，我們著重講解瞭Z軸掃描、光學切片的原理，以及如何利用多色熒光標記技術進行三維重建，強調瞭熒光淬滅與漂白現象的控製。 全書內容緊密圍繞實驗的“為什麼”和“如何做”展開，不僅提供瞭標準操作流程（SOP），更嵌入瞭大量的實驗設計考量、常見問題（Troubleshooting）的診斷與解決方案，力求使讀者能夠獨立、高效地完成各類前沿生物學實驗。

評分☆☆☆☆☆

這本書，說實話，拿到手裏的時候，我還是挺激動的，畢竟是傳說中的“分子剋隆實驗指南”，而且還是第四版，更新迭代瞭這麼多次，想必內容一定是相當的紮實和權威。從拿到書本的那一刻起，我就忍不住翻閱起來，那厚度，那排版，就給人一種沉甸甸的專業感。我記得最開始看的是目錄，那密密麻麻的章節標題，涉及瞭從基礎的質粒構建到復雜的基因錶達調控，每一個主題都像是通往科研前沿的一扇門。書中的插圖和流程圖也做得非常精細，即便是初次接觸這些復雜概念的人，也能通過圖示有一個直觀的理解。我個人對其中關於PCR擴增優化那一章印象特彆深刻，作者似乎很清楚地知道初學者在設計引物和優化反應條件時會遇到哪些“坑”，給齣的建議非常具有實操性，不像有些教材那樣隻停留在理論層麵，而是真正落到瞭“指南”二字上。翻閱過程中，我甚至能想象齣作者們在實驗室裏摸爬滾打多年積纍下來的經驗，那種真誠的分享感，讓人覺得這不是一本冷冰冰的教科書，更像是一位經驗豐富的前輩在手把手地教導你。

評分☆☆☆☆☆

初次接觸這套書的時候，我最直觀的感受是它的“全麵性”。它簡直就像是分子生物學實驗室裏的“百科全書”，幾乎涵蓋瞭所有我能想到的分子剋隆相關的技術點。從最基礎的DNA提取純化，到復雜的基因編輯前沿技術，這本書都沒有放過，而且重點是，它對不同方法之間的優劣勢進行瞭客觀的比較。比如，在比較限製性內切酶消化、粘性末端連接和“一臂長”連接技術時，作者沒有偏袒任何一方，而是清晰地列齣瞭每種方法的適用範圍、效率高低以及可能遇到的副反應，讓讀者可以根據自己的具體實驗需求做齣最明智的選擇。這種不帶傾嚮性的、基於事實的分析，是評價一本優秀工具書的關鍵指標。我特彆欣賞它在描述實驗步驟時，會特意用醒目的方式標注齣那些“需要特彆注意溫度變化”或者“必須在無菌條件下操作”的關鍵節點，這些細節的強調，對於保證實驗的重現性和成功率起到瞭保駕護航的作用，讓人倍感貼心。

評分☆☆☆☆☆

作為一名長期在實驗颱前摸索的研究生，我深知一本好的實驗手冊對於項目進展的決定性作用。這本書的價值，並不在於它提供瞭多少種“新穎”的、尚未被廣泛驗證的“黑科技”，而在於它對經典、核心分子剋隆技術的梳理達到瞭齣神入化的地步。很多最新的技術或許會過時，但那些經過時間考驗的基礎操作，纔是我們立足科研的根本。這本書詳盡地描述瞭每一步操作背後的生物學原理，這遠比單純的“照著做”要來得深刻。例如，在討論基因沉默和過錶達係統時，它不僅介紹瞭載體的選擇標準，還深入分析瞭不同啓動子在不同宿主細胞中的活性差異，這種對實驗背景的深入挖掘，體現瞭作者極高的專業素養和對實驗結果負責的態度。我感覺這本書就像是一份詳盡的“故障排除手冊”，無論遇到什麼常見的實驗失敗，你都能在裏麵找到相似的案例分析和解決思路，極大地減少瞭試錯成本。

評分☆☆☆☆☆

這本書的結構設計得非常巧妙，它不僅僅是把各種實驗方法羅列齣來，而是構建瞭一個邏輯清晰的知識體係。上下中下三冊的劃分，也體現瞭作者對知識深度的考量，從基礎理論到高級應用，循序漸進，絲毫沒有讓人感到突兀。比如，在介紹完各種酶的特性和作用機製後，緊接著就引入瞭如何利用這些酶進行具體的DNA操作，這種“理論支撐實踐”的編排方式，極大地提高瞭學習效率。我記得有一次，我在進行一個比較棘手的載體構建實驗時卡住瞭，翻閱這本書的特定章節，裏麵關於連接效率提升的“小貼士”——那些在正文裏不顯眼但至關重要的細節——一下子點醒瞭我。那種豁然開朗的感覺，就像是迷霧中找到瞭燈塔。而且，這本書的語言風格極其嚴謹，用詞精準，沒有絲毫含糊不清的地方，這對於需要精確執行實驗的科研工作者來說，是至關重要的品質。它迫使你用最標準的術語去理解和描述分子生物學過程，對提升專業素養幫助巨大。

評分☆☆☆☆☆

這本書的裝幀和設計也頗具匠心，要知道，一本經常被翻閱的實驗指南，很容易因為頻繁的使用而磨損。這套書的紙張質量和裝訂都非常紮實，即使我把它放在實驗颱上，被各種溶液不小心濺到，或者反復翻閱查找，它依然保持著良好的形態。更重要的是，內容的更新，即第四版的麵世，體現瞭作者們緊跟時代步伐的努力。我留意到其中關於下一代測序文庫構建的部分，內容描述得非常現代化，沒有采用過時的技術描述，這對於我們這些需要緊跟高通量技術發展的研究人員來說，提供瞭堅實的基礎支撐。總而言之，這本書不僅是一份操作手冊，更像是一份沉澱瞭數十年分子生物學智慧的結晶，它教會我的不僅是“怎麼做實驗”，更是“如何像一個成熟的科學傢那樣去思考實驗設計和結果分析”。它讓我對分子剋隆技術有瞭更係統、更深入的理解，是科研路上不可或缺的良師益友。

評分☆☆☆☆☆

排版質量大有提高。

評分☆☆☆☆☆

不錯，好書～

評分☆☆☆☆☆

不錯，好書～

評分☆☆☆☆☆

排版質量大有提高。

評分☆☆☆☆☆

工作需要，很不錯的一本書

評分☆☆☆☆☆

東西不錯，很實惠，。

評分☆☆☆☆☆

東西不錯，很實惠，。

評分☆☆☆☆☆

排版質量大有提高。

評分☆☆☆☆☆

感覺還可以，整體還不錯…