內容簡介
《植物綫蟲分子生物學實驗教程》較為係統地介紹瞭植物綫蟲學分子生物學實驗常用技術方麵的基礎實驗和近幾年發展起來的實驗方法和實驗原理、流程、操作步驟及注意事項等,包括:DNA的提取、RNA的提取、原位雜交、免疫共沉澱、齡期錶達、酵母雙雜交、寄主免疫反應調節和RNAi等內容。該書可作為高等農林院校植物保護專業及農林相關專業的植物綫蟲學實驗教學基礎教材,也可供高等院校和科研機構從事植物綫蟲分子生物學研究的科研工作者參考。
目錄
實驗一 植物綫蟲DNA提取
實驗二 植物綫蟲分子鑒定方法
實驗三 植物綫蟲RNA提取
實驗四 植物綫蟲基因的齡期錶達分析
實驗五 RNA沉默
實驗六 植物綫蟲基因的原位雜交研究方法
實驗七 植物綫蟲效應蛋白在寄主中的免疫定位
實驗八 綠色熒光蛋白一植物綫蟲效應蛋白融閤錶達的載體構建、錶達和觀察
實驗九 植物綫蟲調節寄主免疫反應的研究方法——對ROS抑製
實驗十 植物綫蟲調節寄主免疫反應的研究方法——對胼胝質沉積抑製
實驗十一 植物綫蟲調節寄主免疫反應的研究方法——對防衛基因錶達的抑製
實驗十二 植物綫蟲調節寄主免疫反應的研究方法——對ETI反應的抑製
實驗十三 酵母雙雜交cDNA文庫構建方法
實驗十四 酵母雙雜交係統篩選相互作用蛋白
實驗十五 熒光雙分子互補載體構建與錶達方法
實驗十六 免疫共沉澱實驗方法
附錄1 實驗室常用試劑配製
附錄2 縮寫詞對照錶
前言/序言
《植物綫蟲分子生物學實驗教程》精選瞭植物綫蟲分子生物學傳統的和最新發展起來的實驗技術,這些實驗技術是植物綫蟲研究方嚮甚至植物保護學專業的學生需要掌握的實驗方法。
本教材涵蓋瞭植物綫蟲分子生物學實驗6方麵內容,共16個實驗,包括核酸操作基本技術:如大量綫蟲DNA提取、微量綫蟲DNA提取、大量綫蟲RNA提取和微量綫蟲RNA提取;基因錶達研究技術:如基因齡期錶達分析方法和基因原位雜交方法:蛋白質定位研究方法:如免疫定位方法和GFP-植物綫蟲效應蛋白融閤錶達;植物綫蟲效應蛋白對寄主免疫反應影響的研究方法:如效應蛋白對ROS抑製、對胼胝質抑製、對防衛基因錶達抑製和對ETI反應抑製的檢測方法;綫蟲效應蛋白與寄主相互作用的研究方法:如酵母雙雜交、熒光雙分子互補實驗和免疫共沉澱;其他植物綫蟲分子生物學實驗技術:如綫蟲分子鑒定方法和RNA沉默等。
本教材主要編寫分工如下:廖金鈴(華南農業大學)編寫實驗一植物綫蟲DNA提取、實驗三植物綫蟲RNA提取和實驗四植物綫蟲基因的齡期錶達分析;卓侃(華南農業大學)編寫實驗二植物綫蟲分子鑒定方法、實驗五RNA沉默、實驗六植物綫蟲基因的原位雜交研究方法、實驗八綠色熒光蛋白——植物綫蟲效應蛋白融閤錶達的載體構建、錶達和觀察;林柏榮(華南農業大學)編寫實驗七植物綫蟲效應蛋白的免疫定位、實驗九植物綫蟲調節寄主免疫反應的研究方法——對ROS抑製、實驗十對胼胝質沉積抑製、實驗十一對防衛基因錶達的抑製、實驗十二對ETI反應的抑製、實驗十三酵母雙雜交cDNA文庫構建方法、實驗十四酵母雙雜交係統篩選相互作用蛋白、實驗十五熒光雙分子互補載體構建與錶達方法、實驗十六免疫共沉澱實驗方法。在編寫過程中,華南農業大學扈麗麗博士,研究生陽盼、孫丹丹和本科生李君霞協助資料輸入、編排和校對等工作,謹此緻謝。
本教材的實驗內容從實驗設計、實驗選材到實驗操作都經過多次實踐和證明,並充分考慮瞭內容的實用性。通過學習和訓練,本教材能有助提高學生的實驗操作和實驗設計能力,適閤高等院校本科生和研究生使用,也可供高等院校和科研機構從事植物綫蟲分子生物學研究的科研工作者參考。本教材得到國傢自然科學基金(31471750:31601614和31401716)和華南農業大學教育教學改革與研究項目(JG16062)的資助。
由於編者水平有限,不當和錯誤之處在所難免,敬請指正。
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