内容简介
《分子克隆实验指南(精编版)》作为一本准确、可靠、明晰的实验操作手册,获得广泛的赞誉,已成为分子生物学工作者必备的案头工具书。
第三版在前两版的基础上对图书内容进行彻底的更新,修改了每一个方案,增加了大量的新内容,拓宽了学科范围,涵盖了各类常规技术、成熟技术和新技术,这些实验技术都是目前世界范围内分离、分析和克隆DNA分子很好实验室日常工作中经常用到的。
精编版专为实验台边的工作者设计,对于遗传学、分子生物学、细胞生物学、发育生物学、神经科学和免疫学专业的学生具有无与伦比的价值,同时给单个研究者提供了“一书在手、方案全览”的便利。
目录
第1章 分子克隆中使用的质粒载体的制备
方案1.1 SDS碱裂解法制备质粒DNA:小量制备
方案1.2 SDS碱裂解法制备质粒DNA:中量制备
方案1.3 SDS碱裂解法制备质粒DNA:大量制备
方案1.4 煮沸法小量制备质粒DNA
方案1.5 煮沸法大量制备质粒DNA
方案1.6 用牙签挑取菌落小量制备质粒DNA
方案1.7 SDS裂解法制备质粒DNA
方案1.8 聚乙二醇沉淀法纯化质粒DNA
方案1.9 层析法纯化质粒DNA
方案1.10 氯化铯�蹭寤�乙锭梯度平衡离心法纯化闭环DNA:连续梯度法
方案1.11 氯化铯�蹭寤�乙锭梯度平衡离心法纯化闭环DNA:不连续梯度法
方案1.12 有机溶剂萃取法从DNA中去除溴化乙锭
方案1.13 离子交换层析法从DNA中去除溴化乙锭
方案1.14 NaCl离心法去除质粒DNA样品中的小片段核酸
方案1.15 Sephacryl S��1000层析法去除质粒DNA样品中的小片段核酸
方案1.16 氯化锂沉淀法去除质粒DNA样品中的小片段核酸
方案1.17 在质粒载体中进行定向克隆
方案1.18 在黏性末端上连接接头
方案1.19 在质粒载体中进行平末端克隆
方案1.20 质粒DNA的去磷酸化
方案1.21 平末端DNA连接合成的接头
方案1.22 在低熔点琼脂糖中连接质粒和目的DNA
方案1.23 制备和转化大肠杆菌感受态的Hanahan 方法:高效的转化 方法
方案1.24 制备和转化感受态大肠杆菌的Inoue 方法:超级感受态细胞
方案1.25 氯化钙制备大肠杆菌感受态
方案1.26 大肠杆菌的电转化
方案1.27 用X�瞘al和IPTG筛选细菌克隆:α互补
方案1.28 小量细菌克隆的杂交筛选
方案1.29 中量细菌克隆的杂交筛选
方案1.30 大量菌落的杂交筛选
方案1.31 菌落的裂解和DNA与滤膜的结合
方案1.32 在滤膜上进行细菌DNA的杂交
第2章 λ噬菌体及其载体
方案2.1 λ噬菌体的平板培养
方案2.2 λ噬菌体噬菌斑的挑取
方案2.3 通过平板裂解和洗脱制备λ噬菌体原种
方案2.4 用小量液体培养制备λ噬菌体原种
方案2.5 λ噬菌体的大规模培养:低倍数感染
方案2.6 从大规模裂解物中沉淀λ噬菌体颗粒
方案2.7 通过凝胶电泳测定λ噬菌体原种和裂解物中DNA的含量
方案2.8 通过CsCl等密度梯度离心纯化λ噬菌体颗粒
方案2.9 通过甘油分 级梯度离心纯化λ噬菌体颗粒
方案2.10 通过沉淀/离心纯化λ噬菌体颗粒
方案2.11 用蛋白酶K和SDS从大规模培养物中提取λ噬菌体DNA
方案2.12 用甲酰胺从大规模培养物中提取λ噬菌体DNA
方案2.13 用作克隆载体的经单一限制性酶切割的λ噬菌体DNA的制备
方案2.14 用作克隆载体的双限制性酶切割的λ噬菌体DNA的制备83
方案2.15 λ噬菌体载体DNA的碱性磷酸酶处理
方案2.16 λ噬菌体臂的纯化:通过蔗糖密度梯度离心
方案2.17 用于基因组文库中的真核DNA的部分 酶切:预反应
方案2.18 用于基因组文库的真核DNA的部分 酶切: 制备反应
方案2.19 λ噬菌体臂与外源DNA片段的连接
方案2.20 基因组文库的扩增
方案2.21 噬菌体DNA从噬菌斑转移到滤膜98
方案2.22 噬菌体DNA在滤膜上的杂交
方案2.23 λ噬菌体快速分 析:从平板裂解物中纯化λDNA
方案2.24 λ噬菌体分 离物的快速分 析:从液体培养物中纯化λDNA
第3章 M13噬菌体载体
第4章 高容量载体的应用
第5章 DNA凝胶电泳和脉冲场琼脂糖凝胶电泳
第6章 真核基因组DNA的制备和分 析
第7章 真核细胞mRNA的提取、纯化和分 析
第8章 聚合酶链反应体外扩增DNA
第9章 放射性标记DNA探针与RNA探针的制备
第10章 人工合成的寡核苷酸探针
第11章 cDNA文库制备及基因鉴定
第12章 DNA测序
第13章 诱变
第14章 表达文库的筛选
第15章 克隆基因在大肠杆菌中的表达
第16章 克隆基因转入培养的哺乳动物细胞
第17章 哺乳动物细胞基因表达分 析
第18章 蛋白质相互作用研究技术
附录
索引
前言/序言
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