內容簡介
《基因工程原理》共8章,係統介紹瞭基因工程基本原理與操作技術,主要包括科學巨匠的貢獻、常規分子技術、工具酶、錶達係統、基因剋隆、基因功能研究策略、動植物基因工程、基因信息分析技術等。注重基礎知識與發展前沿的結閤,緊扣基因工程發展脈絡,體現瞭該領域的新技術、新成就與新動態。本書引用大量科學研究案例,簡明扼要,深入淺齣,注重科學性、先進性、實用性和啓發性。
本書適用於高等院校生命科學領域本科生、研究生的教材,也可作為醫學、環境科學等相關學科教學參考書,也可供相關研究人員參考。
目錄
第1章 緒論
1.1 基因工程的發展曆程
1.1.1 基因概念提齣
1.1.2 基因結構與功能
1.1.3 基因操作關鍵技術突破
1.1.4 基因工程問世
1.2 基因工程大學科與大科學
1.2.1 海量基因信息
1.2.2 復雜基因網絡
1.2.3 基因工程係統
1.3 基因工程研究的意義
1.3.1 揭示生命現象規律
1.3.2 基因工程與疾病治療
1.3.3 基因工程産業
思考題
第2章 基因工程基本技術原理
2.1 核酸的提取與鑒定
2.1.1 基因組DNA的提取
2.1.2 RNA的提取
2.1.3 質粒DNA的提取
2.1.4 核酸的凝膠電泳
2.1.5 變性梯度凝膠電泳
2.1.6 核酸的定量與純度的測定
2.2 PCR技術
2.2.1 PCR的原理
2.2.2 PCR的操作
2.2.3 PCR衍生技術
2.2.4 PCR定點誘變
2.3 核酸序列測定
2.3.1 Sanger雙脫氧鏈終止法
2.3.2 Maxam—Gilbert化學修飾法
2.3.3 Roche 454測序
2.3.4 IUumina測序
2.3.5 ABI SOLiD測序
2.3.6 HeliScope測序
2.3.7 單分子測序
2.3.8 納米孔測序技術
2.4 分子雜交技術
2.4.1 Southern雜交
2.4.2 Northern雜交
2.4.3 Western雜交
2.4.4 菌落原位雜交
2.4.5 熒光原位雜交
思考題
第3章 基因工程工具酶
3.1 限製性核酸內切酶
3.1.1 限製和修飾現象
3.1.2 限製性核酸內切酶的類型
3.1.3 Ⅱ型限製性核酸內切酶的命名
3.1.4 影響限製性核酸內切酶活性的因素
3.2 DNA聚閤酶
3.2.1 大腸杆菌DNA聚閤酶
3.2.2 大腸杆菌DNA聚閤酶Ⅰ的Klenow片段
3.2.3 T4 DNA聚閤酶
3.2.4 T7 DNA聚閤酶(修飾的T7 DNA聚閤酶)
3.2.5 實驗室常用的耐熱DNA聚閤酶
3.2.6 逆轉錄酶
3.3 DNA連接酶
3.3.1 DNA連接酶的類型
3.3.2 DNA連接酶的特點
3.3.3 連接反應的機製
3.3.4 影響連接反應的因素
3.4 核酸修飾酶
3.4.1 末端脫氧核苷酸轉移酶
3.4.2 T4多核苷酸激酶
3.4.3 堿性磷酸酶
3.4.4 核酸外切酶
3.4.5 單鏈DNA內切酶
3.4.6 甲基化酶
思考題
第4章 基因工程載體與錶達係統
4.1 載體概述
4.1.1 載體研究背景
4.1.2 載體共性特徵
4.2 剋隆載體類型
4.2.1 質粒載體
4.2.2 噬菌體載體
4.2.3 噬菌粒載體
4.2.4 病毒載體
4.2.5 人工染色體剋隆載體
4.3 原核錶達係統
4.3.1 原核錶達載體高效錶達的元件
4.3.2 大腸杆菌錶達係統
4.4 真核生物錶達係統
4.4.1 釀酒酵母錶達係統
4.4.2 巴斯德畢赤氏酵母錶達係統
4.4.3 酵母錶達係統的應用
思考題
第5章 目的基因分離與鑒定
5.1 基因文庫法獲取目的基因
5.1.1 基因文庫的構建
5.1.2 cDNA文庫的構建
5.1.3 篩選基因文庫獲得目的基因
5.2.PCR技術分離目的基因
5.2.1 已知基因全長序列
5.2.2 已知基因部分序列
5.3 圖位剋隆獲得目的基因
5.4 轉座子標簽法獲得目的基因
5.5 電子剋隆
5.6 目的基因的鑒定
5.6.1 錶型檢測法
5.6.2 核酸探針雜交法
5.6.3 PCR篩選和序列鑒定法
5.6.4 物理特性檢測法
思考題
第6章 基因功能研究技術
6.1 常規分析技術
6.1.1 基因沉默
6.1.2 基因敲除
6.2 高通量分析技術
6.2.1 基因芯片
6.2.2 蛋白芯片
6.3 大分子相互作用分析技術
6.3.1 免疫共沉澱
6.3.2 染色質免疫沉澱技術
6.3.3 RNA免疫沉澱法
6.3.4 酵母雙雜交
6.3.5 光遺傳
思考題
第7章 動植物基因工程
7.1 轉基因植物
7.1.1 植物基因工程的常用方法
7.1.2 轉基因植物的篩選與鑒定
7.1.3 提高外源基因在植物中錶達水平的策略
7.1.4 轉基因植物的應用
7.2 轉基因動物
7.2.1 動物基因工程的常用方法
7.2.2 轉基因動物的篩選與鑒定
7.2.3 提高外源基因在動物中錶達水平的策略
7.2.4 轉基因動物的應用
思考題
第8章 基因信息分析技術
8.1 常用生物分子數據庫
8.1.1 核酸數據庫
8.1.2 蛋白質序列數據庫
8.1.3 其他常用生物分子數據庫
8.2 軟件分析應用
8.2.1 用BLAST進行局部序列比對
8.2.2 用CLUSTAL進行多序列比對
8.2.3 用Primer Premier進行引物設計
8.2.4 限製性內切酶分析
8.2.5 用JASPAR查找轉錄因子結閤位點
8.2.6 EMBOSS工具包
8.2.7 其他常用生物信息學軟件
思考題
主要參考文獻
前言/序言
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