内容简介
《干细胞实验指南/生物学实验指南丛书》是进行干细胞研究的实验技术类书籍。干细胞研究日新月异,推出一本既能体现目前干细胞技术的水平,又对科研人员的具体实验操作有实际指导作用的图书是我们的初衷。对于实验室新人来说,《干细胞实验指南/生物学实验指南丛书》力求使他们能够迅速地了解干细胞实验所涉及的领域,省时省力地学会做实验。对于已有实验室工作经验的人来说,《干细胞实验指南/生物学实验指南丛书》力图扩展他们的视野。对于导师来说,《干细胞实验指南/生物学实验指南丛书》可部分替代他们对学生基本知识和实验技能的传授。对于生物仪器、试剂公司的业务人员来说,《干细胞实验指南/生物学实验指南丛书》可以使他们了解干细胞实验的基本需求,在推广产品时可以有针对性,表现出个人和公司的专业素养。
目录
第一章 干细胞概述
一、干细胞的定义与特性
二、干细胞的分类
三、干细胞的研究历史及热点
参考文献
第二章 干细胞培养技术概述
第一节 概述
一、细胞培养的优势
二、细胞培养的限制
三、细胞培养的应用
四、细胞培养的基本条件
五、细胞培养的无菌原则
六、细胞实验的注意事项
七、细胞培养液的成分及配制
第二节 干细胞常用培养方法
一、细胞培养方式
二、原代取材
三、传代培养
第三节 干细胞的冻存与复苏
一、细胞的冻存
二、细胞复苏的过程
第四节 细胞污染的检测与鉴定
一、细胞污染
二、细胞污染的预防
第五节 干细胞鉴定方法
一、细胞形态观察
二、核型分析
三、免疫组织化学荧光染色
四、分子水平分析
五、流式细胞分析
六、细胞弧群分析
七、绘制细胞增殖曲线
八、细胞凋亡检测
第三章 胚胎干细胞
第四章 诱导性多能干细胞
第五章 神经干细胞
第六章 造血干细胞
第七章 间充质干细胞
第八章 精原干细胞
第九章 干细胞实验室的建设
附录
索引
精彩书摘
《干细胞实验指南/生物学实验指南丛书》:
造血干细胞(HSCs)是迄今为止研究最为透彻的成体干细胞。1961年Till和McCulloch等在分析骨髓中负责血液再生的细胞时用了两个特征来定义HSCs(Till and McCulloch,1961),一是可以进行自我更新,二是可以产生所有血细胞类型。经过近50多年的研究,随着对HSCs的了解不断深入,HSCs可以从骨髓、脐带血和动员后的外周血中分离获得。HSCs较早应用于临床,用于治疗癌症、血液疾病以及一些免疫系统疾病。另外,HSCs还具有转分化成神经细胞、肌肉细胞以及肝细胞等细胞的能力(Wagersand Weissman,2004)。因此与其他成体干细胞相比,HSCs具有不可比拟的优势。
HSCs在体内需要保证机体血液供应、维持内环境稳态以及在紧急出血或机体受到损害的情况下快速产生大量成熟的血细胞,因此HSCs需具备以下功能(Morrison and Kimble,2006):可自我更新或凋亡以维持自身的数量稳定;可迅速进入分化状态形成血细胞;可迁移至身体其他部位;可维持自身在骨髓中的内环境稳态。所以HSCs最主要的特征就是自我更新以及具有多向分化成所有血细胞类型的潜能。检验小鼠HSCs的黄金标准是把细胞注射到接受过一定射线照射后自身造血细胞被全部杀死的小鼠中,重建小鼠的造血系统。验证人HSCs的功能则需要将其移植到造血系统被射线破坏的非肥胖糖尿病/重症联合免疫缺陷小鼠(Nonobese Diabetic/Severle Combined Immunodeficient Mice,NOD/SCID小鼠, 即在SCID小鼠的基础上与NOD/Lt品系回交的免疫缺陷鼠)中,检测其是否能够恢复小鼠的造血功能(Blank et al.2008)。
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