发表于2024-11-25
F.M.奥斯伯、R.布伦特、R.E.金斯顿、D.D.穆尔 、J.G.塞德曼等主编的《精编分子生物学实验指南( 第5版上下)》是知名度很高、不断*新的《Current Protocols in Molecular Biology》系列的精编版 本。新版对原有内容进行了修订和*新,包括:大肠 杆菌、质粒和噬菌体,DNA的制备和分析,DNA和RNA 的酶学操作,RNA的制备和分析,重组DNA文库的构建 ,重组DNA文库的筛选,DNA序列测定,克隆化DNA的 诱变,DNA导入哺乳动物细胞,蛋白质分析,免疫学 ,DNA-蛋白质相互作用,酿酒酵母,原位杂交和免疫 组织化学,聚合酶链反应,蛋白质的表达,蛋白质磷 酸化的分析,生物信息学,蛋白质相互作用的分析等 ;又新增了染色质的装配与分析,核酸阵列,组合文 库的建立和使用,单个细胞或一群细胞间差异表达基 因的发现和分析四章内容。
本书可供高等院校和科研机构从事分子生物学研 究的科研工作者和研究生参考。
译者序
前言
**章 大肠杆菌、质粒和噬菌体
1.1 培养基的制备及细菌学工具
1.1.1 极限培养基
1.1.2 丰富培养基
1.1.3 固体培养基
1.1.4 实验工具
1.2 在液体培养基中培养
1.2.1 基本方案1 过夜培养
1.2.2 基本方案2 大体积培养
1.2.3 基本方案3 利用计数板监测生长情况
1.2.4 基本方案4 利用分光光度计监测生长情况
1.3 固体培养基上培养
1.3.1 基本方案1 通过连续稀释法滴定和分离细菌菌落
1.3.2 基本方案2 通过平板划线法分离单菌落
1.3.3 基本方案3 通过铺平板分离单个菌落
1.3.4 基本方案4 影印平板
1.3.5 辅助方案菌株的保存和复苏
1.4 经典细菌遗传学选论
1.5 质粒载体
质粒载体的选择
1.6 质粒DNA的小量制备
1.6.1 基本方案1 碱裂解小量制备
1.6.2 备选方案 96孔微量滴定板碱裂解法
1.6.3 基本方案2 煮沸小量制备法
1.7 质粒DNA的大量制备
1.7.1 基本方案1 碱裂解法制备粗制裂解物
1.7.2 基本方案2 氯化铯/溴化乙锭平衡离心法
1.7.3 备择方案 利用阴离子交换层析或分子筛层析纯化质粒DNA
1.8 将质粒DNA导入细菌细胞
1.8.1 基本方案1 CaCl2转化法
1.8.2 备择方案 一步法制备和转化感受态细菌
1.8.3 基本方案2 高效率的电转化方法
1.9 入噬菌体概述
1.9.1 裂解性生长
1.9.2 溶源性生长
1.10 作为克隆载体的入噬菌体
1.10.1 用入噬菌体的优点
1.10.2 选择插入的DNA
1.10.3 入噬菌体来源的克隆载体的图谱
1.11 入噬菌体铺平板产生噬斑
1.11.1 基本方案1 通过连续稀释法分离单个噬斑
1.11.2 基本方案2 噬菌体转染和体外包装构建
1.12 培养入衍生的噬菌体载体
1.12.1 基本方案 通过平板裂解制备噬菌体库
1.12.2 备择方案 制备液体裂解物
1.13 从噬菌体裂解液中制备入DNA
基本方案 通过分级平衡梯度离心制备DNA
1.14 源于丝状噬菌体的载体
1.15 利用M13噬菌体衍生载体制备单链DNA
基本方案 利用辅助噬菌体从质粒制备单链DNA
第2章 DNA的制备和分析
电泳及其应用
凝胶和电路
2.1 水溶液中DNA的纯化和浓缩
2.1.1 基本方案 DNA的酚抽提和乙醇沉淀
2.1.2 备择方案1 异丙醇沉淀DNA
2.1.3 辅助方案1 丁醇浓缩DNA
2.1.4 辅助方案2 醚抽提法去除残存酚、氯仿或丁醇
2.1.5 备择方案2 硅膜离心柱法纯化DNA
2.1.6 备择方案3 RNA及DNA稀溶液的纯化和浓缩
2.1.7 备择方案4 乙醇沉淀法去除低分子质量的寡核苷酸和核苷三磷酸
2.2 阴离子交换色谱法纯化DNA
基本方案
2.3 从哺乳动物组织中制备基因组DNA
基本方案
2.4 从植物组织中制备基因组DNA
2.4.1 基本方案 氯化铯离心法制备植物DNA
2.4.2 备择方案 CTAB制备植物DNA
2.5 从细菌中制备基因组DNA
2.5.1 基本方案 细菌基因组DNA的小量制备
2.5.2 备择方案 氯化铯法大规模制备细菌基因组DNA
……
第3章 DNA和RNA的酶学操作
第4章 RNA的制备和分析
第5章 重组DNA文库的构建
第6章 重组DNA文库的筛选
第7章 DNA序列测定
第8章 克隆化DNA的诱变
第9章 DNA导入哺乳动物细胞
**0章 蛋白质分析
**1章 免疫学
**2章 DNA-蛋白质相互作用
**3章 酿酒酵母
**4章 原位杂交和免疫组织化学
**5章 聚合酶链反应(PCR)
**6章 蛋白质的表达
**7章 蛋白质磷酸化的分析
**8章 生物信息学
**9章 蛋白质相互作用的分析
第20章 染色质的装配与分析
第21章 核酸阵列
第22章 组合文库的建立和使用
第23章 单个细胞或一群细胞间差异表达基因的发现和分析
附录
索引
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