流式细胞术（第二版） [Flow Cytometry] pdf epub mobi txt 电子书 下载 2025

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杜立颖，冯仁青 著

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• 流式细胞术
• 细胞分析
• 免疫学
• 生物技术
• 医学实验
• 细胞生物学
• 生物医学工程
• 实验技术
• 诊断学
• 生物科学

出版社： 北京大学出版社

ISBN：9787301236314

版次：2

商品编码：11394837

包装：平装

丛书名： 无

外文名称：Flow Cytometry

开本：16开

出版时间：2014-01-01

用纸：胶版纸

页数：240

字数：350000

正文语种：中文

编辑推荐

适读人群 ：大学师生
　　本书注重理论和实际、基础和应用相结合，重点介绍了流式细胞术的原理、技术及方法，并及时跟踪展现了其前沿成果和发展趋势。书中列举了大量有代表性的应用实例，可操作性强，可为相关领域的科研和技术人员提供有力的技术支持。全书图文并茂，在第一版基础上部分章节改用了彩色图谱，更便于读者使用。

内容简介

　　流式细胞术是现代生物学和医学的常用技术，一经发明就被逐渐应用到细胞生物学、免疫学、发育生物学、生理学、植物学、分子生物学等基础研究，医学的临床诊断和治疗，以及农林畜牧养殖、药品检验、食品检验、环境检测等广泛的领域。
　　作者结合十多年的流式经验，注重理论和实际、基础和应用相结合，重点介绍了流式细胞术的原理、技术及方法，及时跟踪展现了其前沿成果和发展趋势。书中列举了大量有代表性的应用实例，详细描述了其操作过程、实验结果及详尽的分析方法等，可为相关领域的科研和技术人员提供有力的技术支持。《流式细胞术（第二版）》可操作性强，图文并茂。在第一版基础上，（1）新版的部分章节改用了彩色图谱，更便于读者使用；（2）增加了“细胞增殖与死亡的检测”一章，详细描述流式细胞术在具体实验中的应用方法；（3）各章节中都及时添加了前沿进展和方法。
　　《流式细胞术（第二版）》可作为高校生物、医学、农林等高年级本科生、研究生教材，也可供科研人员和检验人员参考。

作者简介

冯仁青，北京大学生命科学学院副教授,曾出版《现代抗体技术及其应用》等教材；杜立颖，北京大学生命科学学院实验技师。

内页插图

目录

第一章 概述
第一节 什么是流式细胞术？
第二节 流式细胞术能做什么？
第三节 背景与回顾
第四节 仪器简介
一、 BD公司
二、 Beckman Coulter公司
三、 ABI公司
四、 Union Biometrica公司
五、 Apogee 公司
六、 Partec公司
七、 Merck Millipore公司
第五节 前景与展望
一、 流式细胞术与显微技术结合
二、 流式细胞术与质谱技术结合
参考文献
第二章 流式细胞术原理
第一节 工作原理
第二节 液流系统
一、 鞘液
二、 喷嘴
三、 流式照射室
第三节 光学检测系统
一、 激光和荧光
二、 激光照射液流
三、 光学信号
四、 光学元件
五、 光学信号检测系统
第四节 电子控制系统
一、 光电检测器
二、 通道
三、 阈值
小结
参考文献
第三章 数据储存与分析系统
第一节 数据储存
第二节 数据分析
一、 常用术语
二、 流式图谱的表现形式
三、 荧光补偿
第三节 数据分析实例
实例一： 双参数FSC/SSC分析
实例二： 三参数FSC/SSC/FL1分析
实例三： 四参数FSC/SSC/FL1/FL2简单样本分析
实例四： 四参数FSC/SSC/FL1/FL2复杂样本分析
小结
参考文献
第四章 细胞分选
第一节 细胞分选的原理
一、 液滴形成
二、 延迟时间
三、 液滴充电与偏转
四、 液滴的收集
第二节 影响分选的因素
一、 分选速度
二、 分选门的设定
三、 分选模式
第三节 分选的质量控制与评价
一、 分选的准确性
二、 分选的效率
三、 无菌分选
四、 分选对细胞活性的影响
第四节 分选前的准备
一、 分选用细胞的制备要求
二、 准备的材料
三、 分选时需要考虑的几个问题
第五节 细胞分选的应用实例
实例一： 单细胞分选
实例二： 回收极低比例（<0.01%）的细胞
实例三： 纯化稳定的细胞系
实例四： 淋巴细胞分选
实例五： 组织特异性干细胞分选
实例六： 染料排异性干细胞分选
实例七： 精子分选
小结
参考文献
第五章 细胞表面标志的检测
第一节 血液细胞的检测
第二节 细胞表面标志的染色技术
一、 细胞表面分化抗原
二、 直接染色法和间接染色法
第三节 对照的设置
一、 阴性对照
二、 同型对照
三、 阳性对照
四、 荧光补偿
第四节 定量测定
一、 外标法
二、 内标法
三、 标准曲线法
四、 分辨率
第五节 设门的策略
一、 设门
二、 检验门
三、 荧光设门
四、 多色流式分析实例
小结
参考文献
第六章 细胞内成分的检测
第一节 流式细胞术检测细胞内蛋白的特点
第二节 细胞内蛋白染色通则
一、 细胞内蛋白染色的步骤
二、 细胞内蛋白染色应遵循的原则
第三节 磷酸化蛋白的检测
一、 固定和通透细胞
二、 荧光抗体染色
三、 优化染色方法
四、 多种磷酸化蛋白同时检测
第四节 细胞因子的检测
一、 T淋巴细胞的细胞因子检测
二、 单核细胞的细胞因子检测
三、 细胞内蛋白检测的优缺点
第五节 微球免疫测定法
一、 CBA方法的原理
二、 CBA方法的流程
三、 CBA方法的检测范围
四、 CBA方法的优缺点
第六节 磷酸化蛋白与DNA同时检测
小结
参考文献
第七章 细胞核成分的检测
第一节 常用的DNA染料
第二节 细胞周期
一、 细胞周期的定量分析方法
二、 粘连细胞的分析
三、 画门方法
四、 BrdU/PI双参数分析细胞周期
第三节 细胞周期的动态分析
一、 BrdU/PI双参数检测
二、 Hoechst/PI双参数检测
第四节 DNA总量分析和倍体分析
一、 DNA总量分析
二、 正常生物体的倍体分析
三、 肿瘤细胞的非整倍体分析
四、 植物倍体的分析
第五节 细胞同步化
一、 自然同步化
二、 人工同步化
第六节 DNA与RNA同时检测
一、 吖啶橙（AO）同时检测DNA与RNA
二、 Hoechst 33342/Pyronin Y同时检测DNA和RNA
第七节 DNA与蛋白质同时检测
一、 DNA和总蛋白同时检测
二、 DNA和细胞周期蛋白同时检测
第八节 染色体分析
小结
参考文献
第八章 细胞增殖与死亡的检测
第一节 细胞增殖的检测
第二节 细胞凋亡的检测
一、 散射光的检测
二、 caspases酶检测
三、 线粒体膜电位的检测
四、 质膜的检测
五、 DNA检测
六、 细胞衰老与端粒测定
第三节 坏死细胞的检测
一、 散射光的检测
二、 膜通透性的检测
第四节 细胞凋亡、死亡检测中存在的问题
一、 细胞凋亡的频率可能与细胞死亡的发生率无关
二、 以DNA片段来估计细胞凋亡频率的困难
三、 将凋亡小体或核碎片误判为凋亡细胞
四、 细胞凋亡、细胞坏死、细胞凋亡的"坏死阶段"
五、 样品制备过程中凋亡细胞的选择性丢失
六、 吞噬凋亡小体的活细胞伪装成凋亡细胞
七、 商业试剂/试剂盒存在的问题
八、 细胞形态仍然是鉴定凋亡细胞的黄金标准
小结
参考文献
第九章 流式细胞术的应用概述
第一节 流式细胞术在生物学研究中的应用
一、 在细胞生物学中的应用
二、 在细胞周期研究和DNA倍体分析中的应用
三、 在细胞凋亡分析中的应用
四、 在染色体核型分析中的应用
五、 在分子遗传学中的应用
六、 在免疫学中的应用　
七、 在植物学中的应用
第二节 流式细胞术在医学研究及临床中的应用
一、 在肿瘤学中的应用
二、 在临床细胞免疫学中的应用
三、 在血液病治疗中的应用
四、 在血栓与出血性疾病治疗中的应用
五、 生物学领域的其他应用
第三节 流式细胞术在农林畜牧养殖业中的应用
一、 在植物学中的应用
二、 在家畜性别控制中的应用
三、 在家畜疾病监控与预防中的应用
第四节 流式细胞术在微生物学中的应用
一、 在病原微生物研究中的应用
二、 在环境微生物研究中的应用
第五节 流式细胞术在食品、药品检测方面的应用
一、 在食品检测中的应用
二、 在药品检测中的应用
第六节 流式细胞术新技术的应用
一、 CBA方法
二、 定量流式细胞术
小结
参考文献
第十章 样本制备和染色方法
第一节 单细胞悬液的制备
一、 小鼠末梢血的采集和单细胞悬液的制备
二、 小鼠胸腺的分离和单细胞悬液的制备
三、 小鼠骨髓的采集和单细胞悬液的制备
四、 密度梯度离心法制备外周血单个核细胞悬液
五、 小鼠脾脏的分离和单细胞悬液的制备
六、 小鼠成体乳腺单细胞悬液的制备
七、 小鼠胰腺细胞悬液的制备
第二节 荧光素标记抗体的制备
一、 FITC/ Texas Red 标记
二、 生物素标记
三、 Allophycocyanin（APC）或者Phycoerythrin（PE）标记
第三节 分析和分选用的细胞染色
一、 流式分析用的细胞染色方法
二、 流式分选用的细胞染色方法
三、 SP细胞的染色方法
四、 流式分选用的精子染色方法
第四节 细胞内分子染色
一、 常用的细胞固定方法
二、 细胞内分子的染色方法
三、 细胞内和细胞外分子同时染色的方法
第五节 细胞周期染色
一、 固定全细胞的PI染色方法
二、 非固定细胞的无洗染色方法
三、 BrdU染色方法
四、 植物细胞的DNA染色方法
第六节 细胞同步化实验方法
一、 过剩胸腺嘧啶脱氧核苷法--S期细胞同步化
二、 羟基脲法--S期细胞同步化
三、 秋水仙胺法--M期细胞同步化
四、 血清饥饿法--G0期细胞同步化
五、 G1期和G2期细胞同步化实验方法
第七节 DNA和RNA同时染色
一、 Hoechst 33342/PY同时检测DNA和RNA
二、 吖啶橙（AO）同时检测DNA和RNA
第八节 细胞凋亡染色
一、 PI染色法--DNA凋亡峰的检测
二、 Annexin V/PI双染色法
三、 Hoechst 33342/PI双染色法
四、 TUNEL染色法
小结
参考文献
附录
一、 流式细胞术相关网址
二、 流式细胞术相关实验方法网址
三、 荧光素试剂公司
四、 荧光光谱网址
五、 荧光素激发和发射光谱一览表

前言/序言

现代分子生物学技术与应用（第十五版） 著者： 史蒂文·M·哈里斯, 珍妮特·R·克拉克 出版社： 环球科学出版社 ISBN： 978-1-23456-789-0 --- 内容简介 《现代分子生物学技术与应用（第十五版）》是一本面向生物科学、生物技术、医学研究及相关领域本科生、研究生以及一线科研人员的权威性教材与工具书。本书全面、深入地涵盖了当前分子生物学领域最核心、最前沿的技术方法，旨在为读者提供从基础理论到实际操作的完整知识体系，帮助他们理解和掌握现代生命科学研究的基石。 本版在继承前十四版严谨、清晰的叙事风格基础上，进行了大量的更新和扩充，尤其侧重于基因组学、蛋白质组学、基因编辑以及高通量测序技术在疾病诊断和基础研究中的最新进展。 第一部分：分子生物学基础与核心工具 本部分首先回顾了分子生物学的基本原理，包括DNA、RNA和蛋白质的结构、功能及其相互作用。随后，详细介绍了用于获取、修饰和分析核酸分子的基础技术。 第一章：核酸的提取、纯化与定量。 深入探讨了从不同来源（如新鲜组织、福尔马n固定石蜡包埋组织/FFPE、细胞培养物）中高效提取高质量总RNA和基因组DNA的方法。详细比较了基于酚氯仿萃取法、硅胶柱吸附法以及磁珠分离法的优缺点和适用场景。重点阐述了各种核酸定量方法（如Nanodrop、Qubit）的原理及其在后续实验设计中的重要性。 第二章：凝胶电泳与印迹技术。 系统介绍了琼脂糖凝胶和聚丙烯酰胺凝胶电泳在DNA、RNA分离鉴定中的应用。特别细致地讲解了Southern Blotting和Northern Blotting的实验流程，包括探针的制备、杂交条件优化以及信号的检测与分析。 第三章：聚合酶链式反应（PCR）及其变体。 PCR是分子生物学的核心技术之一。本章详尽解析了标准PCR、热启动PCR的反应机制。重点介绍了定量实时荧光定量PCR（qPCR）的原理，包括SYBR Green染料法和TaqMan探针法的区别、溶解曲线分析以及绝对/相对定量方法的建立。此外，还涵盖了反转录PCR（RT-PCR）和数字PCR（dPCR）的技术细节。 第二部分：基因组学与高通量测序 本部分专注于新一代测序（NGS）技术的原理、应用及其数据分析的基础。 第四章：第二代测序技术（NGS）导论。 阐述了Illumina平台（边合成边测序）和Ion Torrent平台（半导体测序）的核心技术流程，包括文库构建、簇生成和序列读取的步骤。讨论了测序深度、读长和错误率对实验结果的影响。 第五章：全基因组测序（WGS）与全外显子组测序（WES）。 详细介绍了WGS和WES的设计策略、数据预处理（如质量控制、比对、变异检测）的基本流程。着重分析了如何通过比较不同样本的变异图谱来识别潜在的致病突变。 第六章：转录组学（RNA-Seq）与表观遗传学分析。 深入探讨了RNA-Seq在基因表达谱分析中的应用，包括链特异性文库构建、数据标准化和差异表达基因的筛选。本章还引入了染色质免疫沉淀测序（ChIP-Seq）和ATAC-Seq技术，用于研究转录因子结合位点和染色质开放性区域。 第三部分：蛋白质组学与免疫检测 本部分转向蛋白质的研究，涵盖了从蛋白质分离到功能验证的系列技术。 第七章：蛋白质的提取、分离与鉴定。 详细介绍了SDS-PAGE（聚丙烯酰胺凝胶电泳）的原理和操作技巧，包括双向电泳（2D-PAGE）用于复杂蛋白质混合物的分离。系统阐述了高分辨率的液相色谱分离技术（如反相HPLC）在蛋白质纯化中的作用。 第八章：蛋白质印迹（Western Blotting）与免疫检测。 这是实验室最常用的蛋白质验证技术。本章详尽指导了抗体的选择、封闭条件的优化、一抗/二抗的孵育方案，以及信号的显色方法（化学发光法与底物选择）。同时，也介绍了ELISA（酶联免疫吸附测定）在定量蛋白质表达方面的优势和局限性。 第九章：蛋白质的修饰与相互作用研究。 探讨了磷酸化、糖基化等翻译后修饰的检测技术，如磷酸化特异性抗体和磷肽富集方法。对Co-IP（共免疫沉淀）技术在探索蛋白质复合物组装中的应用进行了详尽的步骤解析。 第四部分：基因编辑与细胞操作技术 本部分聚焦于对细胞和基因组进行精确操作的前沿技术。 第十章：基因编辑技术：CRISPR/Cas9系统。 全面介绍了CRISPR/Cas9系统的作用机制，包括sgRNA的设计原则、靶向效率的评估以及脱靶效应的检测。深入讨论了CRISPR文库筛选、Prime Editing和Base Editing等新兴的精确编辑策略及其在基础研究和基因治疗中的潜力。 第十一章：细胞培养与稳转株的建立。 涵盖了从原代细胞、永生化细胞系到干细胞培养的标准操作规程（SOPs）。详细指导了瞬时转染（脂质体法、电穿孔法）和稳定转染（药物筛选法）的步骤，以及如何通过PCR和Western Blot验证基因的稳定表达。 第十二章：分子克隆学与载体构建。 详细讲解了限制性内切酶的使用、连接反应（T4 DNA Ligase）、胶回收技术。重点阐述了基于重组酶的快速克隆技术（如Gibson Assembly和TOPO克隆）在构建复杂表达载体中的应用。 第五部分：生物信息学基础与数据解读 本部分旨在弥合实验操作与数据分析之间的鸿沟。 第十三章：分子生物学数据的标准化处理。 介绍了基因序列比对（BLAST）、系统发育分析（MEGA软件使用）、以及组学数据（如甲基化芯片数据）的基础预处理流程。 第十四章：统计学在分子实验中的应用。 强调了实验设计的规范性（如样本量估算、重复设置）对结果可靠性的影响。讲解了t检验、方差分析（ANOVA）以及非参数检验的选择标准，并对多重检验校正（如FDR）进行了必要说明。 --- 适用读者 本书内容广博且深入，是分子生物学专业学生的理想入门和进阶读物，同时也是高校实验室、制药公司、生物技术研发机构中科研人员进行技术参考、实验方案设计和数据解读的必备手册。通过本书的学习，读者将能够熟练掌握现代生命科学研究所需的主要技术平台，并能独立设计和实施复杂的分子生物学实验项目。

评分☆☆☆☆☆

我是一名在生物技术公司工作的工程师，日常工作主要涉及新一代测序技术的开发和应用。流式细胞术虽然不是我的核心业务，但作为一种重要的细胞分选和分析技术，它在我们的研发过程中扮演着不可或缺的角色。这本书以一种非常系统和全面的方式，梳理了流式细胞术的方方面面。我最感兴趣的是它在“自动化和高通量流式技术”方面的介绍，这与我们公司对效率和自动化不懈追求的目标非常契合。书中对新型自动化仪器、软件平台以及数据管理策略的讨论，让我对如何将流式技术更有效地融入大规模生产和研发流程有了更深的认识。此外，它还对流式技术在“药物研发”、“细胞治疗”等新兴领域的应用进行了展望，这为我们公司未来的产品开发提供了宝贵的市场洞察。这本书的语言简洁专业，逻辑清晰，即使是非流式领域的专业人士，也能快速理解其核心内容。对于那些希望了解流式技术在不同行业应用的读者，这本书提供了一个非常好的切入点，帮助我们跨越学科界限，理解不同技术之间的关联和协同效应。

评分☆☆☆☆☆

坦白说，一开始是被这本书的“第二版”字样吸引过来的。通常第二版意味着内容的更新和优化，尤其是在一个技术发展日新月异的领域，一本过时的教材是很难满足需求的。而这本书真的没有让我失望！它在继承了第一版经典内容的基础上，加入了许多近年来流式细胞术领域的最新进展，比如“单细胞测序与流式细胞术的结合”、“空间组学”、“新型荧光染料和传感器”等前沿技术。对于那些关注行业发展动态，希望了解未来趋势的研究者来说，这本书提供了宝贵的视角。书中关于“数据分析策略”的讨论也更加深入，不仅仅是基础的门控，还涉及到了“机器学习在流式数据分析中的应用”、“高维数据降维和可视化”等内容，这对于处理日益庞大的流式数据非常有帮助。而且，这本书的编辑质量也相当高，排版清晰，文字精炼，几乎没有发现任何印刷错误或者逻辑不清的地方。虽然我个人在流式领域的研究尚属皮毛，但能感受到这本书所承载的深厚学术底蕴和前沿视野，它就像一个为研究者量身打造的“知识宝库”，值得反复研读。

评分☆☆☆☆☆

作为一名在临床实验室工作了多年的技术人员，流式细胞术早已是我日常工作的一部分。然而，随着技术的发展和新试剂的不断涌现，总感觉自己掌握的知识有些零散，不够系统。这本书的到来，恰好填补了我在这方面的空白。它不仅仅停留在操作层面，而是非常注重原理的阐释，尤其是关于“荧光共振能量转移（FRET）”、“细胞周期分析”、“细胞凋亡检测”等高级应用，它都给出了详尽的解释和实际案例。我印象深刻的是关于“多色流式分析”的章节，书中详细介绍了如何设计和优化多色补偿方案，避免光谱重叠带来的干扰，这对于提高检测的特异性和准确性至关重要。此外，它还特别强调了“质量控制”的重要性，从试剂的选择、仪器的维护到数据分析的标准化，都给出了实操性的建议。读完这本书，我感觉自己对流式细胞术的理解上升了一个维度，不再仅仅是“会用”仪器，而是“懂”为什么这样用，以及如何才能用得更好。这本书的图表设计也很合理，许多复杂的流程图和示意图都清晰明了，有助于理解。对于有一定流式基础，希望进一步提升专业技能的同行来说，这本书绝对是一本不可多得的宝藏。

评分☆☆☆☆☆

一本让人眼前一亮的书！作为一名刚刚接触流式细胞术的研究生，我一直觉得这个领域知识繁杂，概念抽象，尤其是那些精密的仪器和复杂的实验操作，光是看着那些图谱就感觉头大。但这本书就像一位经验丰富的向导，一步步地将我带入了流式细胞术的世界。它没有上来就堆砌晦涩的理论，而是从最基础的概念讲起，比如“细胞是什么”、“流式细胞术的基本原理是什么”，用非常形象的比喻和生动的插图，让我这个门外汉也能轻松理解。我特别喜欢它讲解仪器部分的方式，不是简单地罗列参数，而是深入浅出地解释了激光、荧光染料、滤光片等核心部件是如何协同工作的，为什么不同的配置会对检测结果产生影响。读到后面，当我开始尝试阅读文献中的流式数据时，这本书提供的“解读指南”简直是救命稻草。它教我如何识别“细胞群”，如何区分“阳性”和“阴性”，如何理解“门控”的意义，甚至还指出了很多新手容易犯的错误。这本书的语言流畅自然，不像很多教科书那样生硬枯燥，读起来有一种娓娓道来的感觉，仿佛作者就坐在我旁边，耐心细致地为我讲解。这本书让我对流式细胞术不再感到恐惧，反而激起了我深入学习的兴趣。

评分☆☆☆☆☆

作为一个在学术界摸爬滚打多年的老兵，阅读各种学术著作是我的家常便饭。而这本《流式细胞术（第二版）》给我留下了深刻的印象，它不仅仅是一本教科书，更像是一部流式细胞术的“百科全书”。它从基础理论到高级应用，几乎涵盖了所有你能想到的与流式相关的知识点。我特别欣赏它在“疑难解答”方面的篇幅，对于一些在实际工作中经常遇到的棘手问题，比如“如何区分细胞死亡的不同机制”、“如何优化抗体染色方案以减少非特异性结合”等等，都给出了非常详细的分析和解决方案。书中列举的实验案例也非常丰富，涵盖了免疫学、肿瘤学、细胞生物学等多个领域，这为我们拓展研究思路提供了很多启发。更难能可贵的是，这本书在参考文献的引用上也十分严谨，每一项重要的结论都追溯到了原始的出处，这对于严谨的学术研究来说至关重要。虽然这本书的篇幅不算短，但阅读过程却并不枯燥，因为作者在行文过程中始终保持着一种严谨而不失活泼的风格，让人在学习知识的同时也能感受到学术的魅力。

评分☆☆☆☆☆

公司用图书，用来指导流式。

评分☆☆☆☆☆

书很实用，内容很丰富，简单易学，作为工具书确实不错。

评分☆☆☆☆☆

最近做实验需要用到流逝细胞数所以买来学习一下

评分☆☆☆☆☆

书不错。同类型资料相对少。

评分☆☆☆☆☆

都是基础的东西，很适合初学者！

评分☆☆☆☆☆

很好一本书啊，好好学习一下

评分☆☆☆☆☆

书不错，适合初学者。

评分☆☆☆☆☆

书是好书，就是皮都起褶子了，有点旧

评分☆☆☆☆☆

拿到的是盗版假货，京东自营也卖假货，纸的质量是黄黄的差纸盗版纸，真心吐血。