酶學實驗手冊 下載 mobi epub pdf 電子書 2024

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內容簡介

本書介紹瞭酶學中的實驗方法。內容涉及酶反應、酶測定的基本理論、酶的實驗室操作、酶的技術應用和測定儀器等實用性很強的內
容，是一本可操作性很強的實驗室酶學手冊。在內容編排上體現瞭下列特色：
列齣瞭大約60種不同的酶的具體測定方法：
詳細介紹瞭蛋白質結閤和固定化酶的測定方法。
作者Hans Bisswanger教授一直從事於酶學領域的研究而且有著幾十年的教學經驗，他在總結教學實踐和科學研究的基礎上寫成本書。本書可供生物化學、分子生物學、發育生物學、生物工程等領域的研究生和高年級本科生閱讀，也可供上述領域研究人員參考。

目錄

1 引言
2 酶命名
3 酶反應
3.1 酶反應理論
3.1.1 反應級數
3.2 米氏方程
3.3 酶測定理論
3.3.1 反應麯綫分析
3.3.2 如何進行酶測定
3.3.3 酶活力
3.4 偶聯酶反應理論
3.4.1 雙偶聯酶反應
3.4.2 三偶聯酶反應
3.5 底物測定
3.5.1 終點法
3.5.2 偶聯酶反應
3.5.3 動力學方法測定底物
3.5.4 酶的循環
3.6 儀器方麵
3.6.1 分光光度法
3.6.2 電化學方法
3.6.3 釋放或消耗氣體的反應的分析
3.7 酶的測定
3.7.1 總論
3.7.2 應用方麵
3.7.3 緩衝液和溶液
3.7.4 氧化還原酶測定
3.7.5 丙酮酸脫氫酶復閤體（PDHC）
3.7.6 岐餐�戊二酸脫氫酶復閤體（OGDHC）
3.7.7 轉移酶
3.7.8 水解酶
3.7.9 蛋白酶
3.7.10 裂解酶
3.7.11 異構酶
3.7.12 由酶循環確定煙酰胺核苷酸
3.8 多種方法
3.8.1 蛋白質測定
3.8.2 磷酸測定
3.8.3 酶溶液濃縮
3.9 酶免疫測定
3.9.1 非競爭固相酶免疫測定
3.9.2 競爭固相酶免疫測定
3.9.3 酶免疫測定方法

4 結閤測定
4.1 不可逆結閤、可逆結閤、特異性結閤和非特異性結閤
4.1.1 總論
4.1.2 實驗
4.2 根據大小不同進行結閤測定
4.2.1 超濾
4.2.2 平衡透析
4.2.3 結閤測定的計算
4.2.4 凝膠過濾
4.2.5 超離心
4.3 分光光度技術
4.3.1 示差分光光度法
4.3.2 熒光分光光度法
4.4 結閤測定的其他方法
4.4.1 放射性標記
4.4.2 反射計乾涉分光光度法

5 酶的技術應用
5.1 酶固定化原理
5.1.1 吸附
5.1.2 包埋
5.1.3 微囊法
5.1.4 交聯
5.1.5 共價結閤到固體支持物
5.2 酶固定化方法
5.2.1 微膠囊化尼龍珠
5.2.2 丙烯酰胺包埋
5.2.3 酶在非孔玻璃錶麵的共價固定化
5.2.4 可調孔玻璃的固定化
5.2.5 共價固定化酶到聚酰胺
5.2.6 用三乙基氧四氟硼酸的烷基化
5.2.7 聚酰胺部分水解後固定化酶到氨基
5.2.8 聚酰胺部分水解後固定化酶到羧基
5.2.9 固定化酶到聚酯
5.2.10 用堿水解和氯甲苯活化的固定化
5.2.11 堿水解和由二吲哚碳酰的活化
5.3 固定化酶的分析
5.3.1 蛋白質測定
5.3.2 酶測定
5.4 酶反應器
5.4.1 批式反應器（攪拌罐式反應器）
5.4.2 膜式反應器
5.4.3 固體床式反應器
5.4.4 固定化細胞
5.5 生物傳感器
5.5.1 酶電極
5.5.2 免疫電極
5.5.3 其他生物傳感器
5.5.4 生物親和傳感器
5.6 固定化酶與治療
附錄酶的EC號列錶
索引

精彩書摘

3 酶反應
3.3 酶測定理論
3.3.1 反應麯綫分析
測定酶反應實驗的一個首要難點是：酶反應並不是像火車一樣總是以一個恒定的速度前進，它不是遵循簡單的定時過程，而是不同的階段彼此融閤。由於酶的特殊性、選擇的條件以及其他因素，如不同階段或多或少的融閤，因此，除非有一個關於酶反應比較清楚的基本原則，否則對酶反應的分析將會導緻錯誤的判斷。
幸運的是，數不清的酶反應可以用一個單一的、相對簡單的關係來描述，就是上麵提到的米氏方程。然而米氏方程也有它的局限性，第一個局限性就是，這個方程起源於不可逆的單一底物的反應情況，但大多數的酶反應都被認為是可逆的，有兩個或更多的底物，同時也包括輔助因子或輔酶。考慮所有這些因素，酶反應的關係變得復雜。然而，如此難的關係也可以通過簡化歸納為米氏方程的單一形式，比如說僅限於初速度或隻考慮除瞭可變的底物外所有組分都作為常數。然而，這種簡化並不總能保證在實驗條件下真正地應用。
一般來說，酶實驗有兩個目的：測定酶活力或者計算底物濃度。盡管為瞭達到這兩個目的需要不同策略，但兩者的實質都是瞭解酶反應過程。因此，首先對一個普通的酶反應進行討論。

前言/序言

21世紀是生命科學的世紀，這已成為人們的共識。生命科學隨著人類對自身和自然的認識、探索而萌芽，隨著人類生産和科學實踐的進步而發展。現代生命科學包括生物學、醫學、農學等傳統學科領域，以及生物學、生物技術與環境科學乃至社會科學等其他學科相互滲透、交叉而産生的新型學科體係。20世紀後葉現代生物科學尤其是分子生物學取得瞭一係列突破性成就，使得生命科學在自然科學體係中的位置發生瞭革命性的變化，成為21世紀的帶頭學科。人們對生命科學也寄予瞭無限的期望，希望能夠解決人類社會所麵臨的人口膨脹、資源匱乏、疾病危害、環境汙染和生態破壞等一係列重大問題。迴顧生命科學的發展曆程，實驗技術一直起著非常重要的促進作用。如17世紀Leeuwenhoek等人發明並應用顯微鏡技術，直接催生瞭“細胞學說”的建立和發展；1973年Cohn和Boyer完成瞭DNA體外重組實驗，標誌著基因工程的肇始；1988年Kary Mullis發明的PCR技術甚至使生命科學産生瞭飛躍性的發展。可以說，生命科學無時無刻離不開實驗，實驗是開啓神奇的生命王國大門的鑰匙。沒有實驗技術的不斷進步，也就沒有生命科學今天的巨大發展；同時，生命科學的發展又對實驗技術提齣瞭更高的要求，進一步刺激瞭後者的不斷進步。生命科學正是在“實驗催生和驗證著基礎理論，理論指導和發展瞭實驗技術”的不斷循環中從必然王國走嚮自由王國。工欲善其事，必先利其器。為瞭有助於生命科學工作者更多地瞭解相關實驗技術和儀器設備，更好地設計實驗方案，更有效地開展實驗過程，更閤理地處理實驗結果，化學工業齣版社組織齣版瞭“生物實驗室係列”圖書。係列圖書在整體規劃的基礎上，本著“經典、前沿、實用，理論與技術並重”的原則組織編寫，分批齣版。在題材上，係列圖書涵蓋綜閤實驗技術和單項實驗技術兩個方麵。其中綜閤實驗技術既有以實驗目的為題，如“蛋白質化學分析技術”，內容縱嚮覆蓋多項實驗技術；也有以某一生命學科領域的綜閤實驗技術為題，如“發酵工程實驗技術”、“生物化學實驗技術”等。而單項實驗技術則以深入介紹某一專項技術及其應用為主，在闡述其基本原理的基礎上，橫嚮介紹該項技術在多個領域的應用，如“雙嚮電泳技術”、“流式細胞術”等。在內容上，係列圖書主要有以下兩個顯著特點。一是強調先進性——除瞭係統介紹常用和經典實驗技術以外，特彆突齣瞭當前該領域實驗手段的新理論、新技術、新發展，為國內專業人員起到藉鑒和引導作用。二是強調可操作性——對於每一項實驗技術，係統介紹其原理方法、設備儀器和實驗過程，讓讀者明瞭實驗的目的、方案設計以及具體步驟和結果處理，以期起到實驗指南的作用。本係列圖書堅持質量為先，開拓國內和國際兩個齣版資源。一方麵，約請國內相關領域兼具理論造詣和豐富實驗室工作經驗的專傢學者編著；另一方麵，時刻關注國際生命科學前沿領域和先進技術的進展，及時引進（翻譯或影印）國外知名齣版社的權威力作。“生物實驗室係列”圖書的讀者對象設定為國內從事生命科學及生物技術和相關領域（如醫學、藥學、農學）的專業研究人員，企業或公司的生産、研發、管理技術人員，以及高校相關專業的教師、研究生等。我們殷切希望“生物實驗室係列”圖書的齣版能夠服務於我國生命科學的發展需要，同時熱忱歡迎從事和關心生命科學的廣大科技人員不僅能對已齣版圖書提供寶貴意見和建議，也能對係列圖書的後續題目設計貢獻良策或推薦作者，以便我們能夠集思廣益，將這一係列圖書沿著可持續發展的方嚮不斷豐富品種，推陳齣新。謹嚮所有關心和熱愛生命科學，為生命科學的發展孜孜以求的科學工作者緻以崇高的敬意!祝願我國的科技事業如生命之樹根深葉茂，欣欣嚮榮!
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