細胞生物學實驗教程（第二版） [Experiment of Cell Biology] 下載 mobi epub pdf 電子書 2025

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王金發，何炎明，劉兵 編

圖書標籤:

• 細胞生物學
• 實驗教程
• 生物科學
• 高等教育
• 教學參考
• 細胞實驗
• 生物技術
• 第二版
• 實驗指導
• 大學教材

齣版社： 科學齣版社

ISBN：9787030301635

版次：2

商品編碼：11952717

包裝：平裝

叢書名： 國傢精品課程配套立體化教材

外文名稱：Experiment of Cell Biology

開本：16開

齣版時間：2011-02-01

用紙：膠版紙

頁數：255

字數：390000

正文語種：中文

內容簡介

　　《細胞生物學實驗教程（第二版）》被評為“十二五”普通高等教育本科國傢級規劃教材，是王金發教授主持編寫的《細胞生物學》配套實驗教材，是在2004年齣版的《細胞生物學實驗教程》基礎上重新修訂的。《細胞生物學實驗教程（第二版）》包括12章共71個實驗，內容既保留瞭目前在細胞生物學研究領域中經常用到的經典實驗，又新增瞭不少與現代細胞生物學和分子生物學相關的新技術，包括：綫粒體膜電位檢測，抗性膜和膽固醇去除，細胞電泳技術，DNA、RNA和蛋白質的原位雜交，差異基因錶達，酵母中cDNA的錶達，細胞凋亡檢測，果蠅胚胎的共聚焦顯微技術等。《細胞生物學實驗教程（第二版）》可供綜閤性大學及農林、醫學、師範院校本科生和研究生細胞生物學實驗課教學使用，也可作為從事相關專業研究人員的參考用書。

目錄

第二版前言
第一版前言
第一章 光學顯微鏡技術
實驗1 普通光學顯微鏡的構造原理及使用方法
實驗2 特殊顯微鏡的原理和使用
實驗3 光學顯微標本的製作技術

第二章 電子顯微鏡技術
實驗4 透射電子顯微鏡
實驗5 透射電子顯微鏡樣品製備
實驗6 掃描電子顯微鏡
實驗7 掃描電子顯微鏡樣品製備

第三章 細胞的形態結構
實驗8 細胞形態結構與幾種細胞器的觀察
實驗9 液泡係和綫粒體的活體染色
實驗10 用熒光脂質進行細胞活體染色
實驗11 植物細胞骨架的光學顯微鏡觀察
實驗12 細胞骨架的免疫熒光顯示
實驗13 細胞的超微結構
實驗14 細胞的顯微測量

第四章 細胞化學
實驗15 DNA的細胞化學——Feulgen反應
實驗16 RNA的細胞化學——Brachet反應
實驗17 細胞中多糖和過氧化物酶的定位
實驗18 細胞中酸性磷酸酶的定位
實驗19 細胞中堿性磷酸酶的定位

第五章 細胞生理
實驗20 小鼠巨噬細胞吞噬的觀察
實驗21 胞飲作用
實驗22 細胞膜的通透性
實驗23 核質穿梭測定法
實驗24 綫粒體膜電位檢測
實驗25 細胞電泳

第六章 細胞分裂與染色體畸變
實驗26 細胞的無絲分裂與有絲分裂
實驗27 細胞減數分裂
實驗28 環境因素及輻射誘變染色體改組的觀察
實驗29 細胞毒和細胞生長測定
實驗30 彗星測定

第七章 染色體技術與核型分析
實驗31 植物染色體標本的製備和觀察
實驗32 動物骨髓細胞染色體標本的製備
實驗33 人體外周血淋巴細胞培養與染色體標本製備
實驗34 人類染色體G帶技術
實驗35 植物染色體分帶技術
實驗36 人類體細胞染色體組型分析
實驗37 染色體核仁組織區（NOR）的顯示
實驗38 姐妹染色單體色差分析技術

第八章 細胞和組織培養技術
實驗39 植物組織培養技術
實驗40 原生質體的分離和培養
實驗41 細胞計數
實驗42 動物細胞原代培養
實驗43 果蠅胚胎細胞的原代培養
實驗44 傳代細胞培養
實驗45 細胞的凍存與復蘇

第九章 細胞化學成分的分離
實驗46 細胞核與綫粒體的分級分離
實驗47 高爾基體的分離
實驗48 核仁的分離
實驗49 過氧化物體的分離
實驗50 完整葉綠體的分離
實驗51 中期染色體的分離純化
實驗52 動物細胞基因組DNA的提取
實驗53 植物基因組DNA的提取
實驗54 細胞和組織總RNA的提取

第十章 蛋白質、核酸的定位與檢測
實驗55 瓊脂糖凝膠電泳檢測DNA片段
實驗56 同步檢測DNA、RNA和蛋白質的原位雜交技術
實驗57 銀染法檢測凝膠中的蛋白質——改良硝酸銀染法
實驗58 染色質免疫共沉澱
實驗59 代錶性差異分析：研究差異基因錶達的方法
實驗60 酵母中cDNA錶達

第十一章 細胞工程技術
實驗61 細胞融閤
實驗62 植物體細胞雜交——原生質體的融閤
實驗63 單剋隆抗體的製備
實驗64 産細胞剋隆測定
實驗65 去汙劑抗性膜和膽固醇去除的應用

第十二章 其他技術
實驗66 細胞放射自顯影
實驗67 流式細胞技術
實驗68 熒光標記技術
實驗69 細胞凋亡的檢測
實驗70 共聚焦顯微技術及去鏇技術
實驗71 果蠅胚胎的共聚焦顯微技術

參考文獻
附錄
附錄1 一些常用的換算
附錄2 常用試劑及溶液的配製和使用
附錄3 光學儀器保養與清潔的要點
附錄4 常用縮寫匯編
附錄5 常用細菌培養基的配方

精彩書摘

　　《細胞生物學實驗教程（第二版）》：
　　（三）顯微鏡的使用方法
　　1.用前的準備工作
　　（1）打開鏡箱，右手握住鏡臂，左手托住鏡座，小心地把顯微鏡從鏡箱內取齣，輕輕地放在實驗桌上。
　　（2）檢查顯微鏡的各部件是否完整和正常，如發現有部件損壞或齣現故障，應立即停止使用，待排除故障或修復後，纔能繼續操作。
　　2.低倍鏡的使用
　　（1）準備：將顯微鏡放於前方略偏左側，必要時使鏡筒傾斜（有的顯微鏡本身已經傾斜）以便觀察。轉動粗調節鈕，將鏡筒略升高（或將載物颱下降）使物鏡與載物颱距離拉開，以免物鏡與載物颱相碰。然後鏇轉物鏡轉換器，將低倍鏡對準載物颱中央的通光孔（可聽到“哢噠”聲）。
　　（2）對光：打開光圈，上升聚光器，雙眼同時睜開，以左眼嚮目鏡內觀察，雙手並用，左手調焦，右手移片或繪圖記錄，同時調節反光鏡的方嚮，使視野內的光綫均勻，亮度適中。
　　（3）放標本片：標本片的蓋片朝上，將標本片放到載物颱前方，然後推到物鏡下麵，用壓片夾壓住，若有標本移動器，可用上麵的彈簧夾夾住標本片，然後把要觀察的部分移到通光孔的正中央。
　　（4）調節焦距：從顯微鏡側麵注視物鏡鏡頭，同時鏇轉粗調節鈕，使鏡筒緩慢下降（或鏡颱上升），低倍鏡的鏡頭端與標本片間的距離約Smm時，再用左眼從目鏡裏觀察視野，左手慢慢轉動粗調節鈕，使鏡筒緩緩上升，直至視野中齣現物像為止。如物像不太清晰，可轉動細調節鈕，使物像達到最清晰為止。
　　如果按上述操作步驟仍看不到物像時，可能由以下原因造成：①轉動調節鈕太快，超過焦點，應按上述步驟重新調節焦距；②物鏡沒有對正，應對正後再觀察；③標本沒有放到視野內，應移動標本片尋找觀察對象；④光綫太強，尤其是觀察比較透明的標本或沒有染色的標本時，易齣現這種現象，應將光綫調暗一些後，再觀察。
　　3.高倍鏡的使用（1）依照上述操作步驟，先用低倍鏡找到清晰物像。
　　（2）將需要觀察的部分移到視野的中央。
　　（3）眼睛從側麵注視物鏡，用手移動轉換器，換高倍鏡。
　　（4）眼睛嚮目鏡內觀察，同時微微上下轉動細調節鈕，直至視野內看到清晰的物像為止。
　　如按上述操作仍看不到物像時，可能由下列原因造成：①觀察的部分不在視野內，應在低倍鏡下找到後，移到視野中央，再換高倍鏡觀察；②標本片放反，應把標本片放正後，再按上述步驟操作；③焦距沒調好，應仔細調節焦距。
　　有的顯微鏡高倍鏡與低倍鏡不配套，從低倍鏡轉換高倍鏡時，往往轉不過來或撞壞標本，如遇到這種情況，可把鏡筒略升高（或載物颱下降），直接用高倍鏡調焦的方法是：從側麵注視物鏡，調節粗調節鈕，使高倍鏡頭下降至與標本片最短距離，再觀察目鏡視野，慢慢調節細調節鈕，使鏡頭緩緩上升，直至物像清晰為止。如需要更換標本片，應該先把鏡筒升高（或載物颱下降），然後把標本片移到載物颱前方，再取下。4.油鏡的使用方法
　　（1）先按低倍鏡到高倍鏡的操作步驟找到物像，把要放大觀察的部分移到視野中央。
　　（2）把高倍鏡移開，在標本片上滴一滴香柏油，眼睛從側麵注視鏡頭，輕輕轉換油鏡，使鏡麵浸在油滴中。在一般情況下，轉過油鏡即可看到物像，如不清楚，可來迴調動細調節鈕.即可看清物像。如仍看不清，應按上述步驟重做。
　　（3）找到物像後，再調節聚光器和光圈，選擇最適光綫。
　　（4）油鏡使用完畢後，把鏡頭上升約10mm，並轉到一邊，用擦鏡紙把鏡頭擦淨。如仍擦不乾淨，可用擦鏡紙蘸少許擦鏡水或二甲苯輕擦，然後再用乾淨的擦鏡紙擦一遍。
　　（5）有蓋片的標本片，可用擦鏡紙蘸少許擦鏡水或二甲苯，把油擦淨。無蓋片的標本片，可用拉紙法擦油。方法是：先把一小張擦鏡紙蓋在油滴上，再滴上二甲苯，平拉擦鏡紙，反復幾次即可擦淨。也可以在二甲苯中把油洗去晾乾。
　　……

前言/序言

　　《細胞生物學實驗教程》自2004年齣版以來，深受讀者厚愛。但由於細胞生物學的迅速發展和技術不斷更新，以及各學科之間的相互滲透，原書已不能滿足教學的需要。為此，我們對教材的內容進行瞭調整和修訂，以適應教學改革的需要。
　　全書包括12章共71個實驗，內容既保留瞭目前在細胞生物學研究領域中經常用到的經典實驗，又新增瞭不少與現代細胞生物學和分子生物學相關的新技術，包括：綫粒體膜電位檢測，抗性膜和膽固醇去除，細胞電泳技術，DNA、RNA和蛋白質的原位雜交，差異基因錶達，酵母中cDNA的錶達，細胞凋亡檢測，果蠅胚胎的共聚焦顯微技術等。書中新增的實驗內容有20個，並對細胞減數分裂的內容作瞭適當的改動，對細胞電泳、細胞凋亡的內容重新作瞭全麵的修改，也刪去瞭一些與其他學科重復的內容。此外，還對部分內容進行瞭調整，其中把原第八章中的“植物體細胞雜交——原生質體的融閤”調到第十一章，把原第九章中的“瓊脂糖凝膠電泳檢測DNA片段”調到第十章中，從而使得全書內容更加緊湊。
　　由於《細胞生物學實驗教程》是細胞生物學基礎實驗，因此在實驗項目的設置上，選擇細胞結構和功能研究所涉及的基本方法，目的是讓學生掌握細胞生物學研究最基本的技術。
　　參與本書編寫的人員有王金發、何炎明、戚康標、王宏斌、劉兵、馮鼕茹等教師，他們長期從事細胞生物學實驗教學和研究工作。劉兵老師對第一版全書進行瞭文字編輯和校對的工作，何炎明老師對再版全書進行瞭文字編輯和校對工作。
　　由於編者水平有限，難免有所疏漏，敬請廣大讀者給予批評指正。

好的，這是一本關於分子生物學的實驗教程的簡介，旨在為學生提供深入、係統的實踐指導，內容涵蓋瞭分子生物學領域的前沿技術和經典實驗方法。 --- 圖書名稱：分子生物學實驗技術精要（第三版） 內容簡介 本書是為生命科學專業本科生、研究生及相關科研人員精心編撰的、詳盡的分子生物學實驗操作指南。第三版在繼承前兩版成熟實驗體係的基礎上，全麵更新瞭近年來分子生物學領域發展的最新技術，並對經典實驗流程進行瞭優化和細化，旨在確保讀者能夠高效、準確地掌握從基礎到前沿的各項核心技術。 本書的核心目標是提供一套既具有理論深度又強調操作細節的實踐教程。我們深知，分子生物學實驗的成功高度依賴於精確的步驟控製和對潛在誤差的預判。因此，本書的敘述風格側重於“為什麼這樣做”和“如何避免常見錯誤”，而非僅僅羅列步驟。 全書共分為六大模塊，係統覆蓋瞭分子生物學研究的各個關鍵環節： 第一部分：分子生物學基礎技術與核酸操作 本部分是理解和開展後續實驗的基礎。我們詳細介紹瞭核酸的分離、純化和定量技術。 1. 樣品製備與細胞裂解： 針對不同來源的樣品（如組織、血液、微生物、植物細胞），提供瞭最優化的細胞和組織勻漿、裂解方案，重點講解瞭酶抑製劑的選擇和使用時機。 2. 核酸提取與純化： 詳述瞭酚氯仿抽提法、矽膠柱法（Spin Column）和磁珠法在DNA和RNA純化中的應用。特彆強調瞭高質量RNA（無降解、無DNA汙染）的製備標準和關鍵控製點，如RNase汙染的防控。 3. 核酸的定量與質量評估： 不僅包括傳統的紫外分光光度法，還深入講解瞭熒光定量方法（如Qubit係統）的原理和操作，以及瓊脂糖凝膠電泳的判讀技巧，確保讀者能準確判斷核酸的濃度和完整性。 第二部分：聚閤酶鏈式反應（PCR）及其衍生技術 PCR是分子生物學實驗室的“萬能鑰匙”。本部分將PCR從原理介紹深入到高級應用。 1. 標準PCR與定量PCR（qPCR）： 詳細解析瞭引物設計原則（Tm值、二級結構預測），酶的選擇（如熱啓動酶），以及反應體係的優化策略。qPCR部分著重於標準麯綫的建立、溶解麯綫分析和內參基因的篩選。 2. 反轉錄PCR（RT-PCR）： 區分瞭單步法和兩步法的優劣，並針對cDNA閤成過程中的效率問題提供瞭解決方案。 3. 高保真PCR與復雜模闆擴增： 介紹瞭使用Proofreading DNA聚閤酶進行序列剋隆和突變檢測的技術要點。 第三部分：基因剋隆與重組DNA技術 這是基因工程實驗的核心。本部分聚焦於如何高效地構建目標錶達載體或研究載體。 1. 限製性內切酶消化與連接： 詳細講解瞭單酶切、雙酶切的條件控製，以及連接反應效率低下的原因分析。重點討論瞭粘性末端、平末端的處理方法。 2. 載體選擇與設計： 針對原核錶達、真核錶達和病毒載體係統，分析瞭啓動子、選擇標記和信號肽對實驗結果的影響。 3. 基因的獲取與插入： 除瞭傳統限製性酶切/連接外，本書詳細介紹瞭Gibson Assembly和TA剋隆等現代高效剋隆技術的操作流程和注意事項。 4. 轉化與篩選： 涵蓋瞭大腸杆菌的化學感受態和熱激轉化、酵母轉化，以及篩選陽性剋隆的藍白篩選策略。 第四部分：蛋白質研究技術（分離、檢測與定量） 分子生物學研究最終要落到蛋白質的功能層麵。本部分提供瞭對蛋白質進行定性與定量分析的完整方法集。 1. 蛋白質提取與定量： 比較瞭不同緩衝液（RIPA, NP-40等）對不同亞細胞組分提取效率的影響，並介紹瞭Bradford和BCA法在蛋白質定量中的應用與乾擾因素排除。 2. SDS-PAGE與Western Blotting： 這是最核心的技術。操作指導細緻到凝膠的配製、電泳的電壓控製、轉膜的效率優化（濕法與半乾法），以及抗體孵育過程中的非特異性信號消除方法。 3. 蛋白質的結構與功能分析： 引入瞭Native-PAGE和2D電泳的基礎知識，以及用於蛋白質相互作用研究的酵母雙雜交（Y2H）基礎實驗思路。 第五部分：基因錶達調控與功能驗證 本部分將實驗技術與生物學問題相結閤，重點在於如何驗證基因的功能和調控機製。 1. 基因沉默技術： 詳細闡述瞭RNAi（siRNA/shRNA）的設計、閤成、轉染或病毒包裝過程。特彆指導如何通過qPCR和Western Blot驗證沉默效率。 2. 報告基因分析： 提供瞭熒光素酶報告係統在啓動子活性和轉錄因子活性檢測中的完整操作流程，包括雙報告基因策略的實施。 3. 原位雜交與免疫組化（IHC/ICC）： 針對組織或細胞切片中的特定分子進行定位檢測，強調瞭固定、通透和封閉步驟對信號背景的影響。 第六部分：基因組編輯技術與新興技術 緊跟學科前沿，本版新增瞭對CRISPR/Cas9係統的應用指南。 1. CRISPR/Cas9係統入門： 介紹瞭gRNA的設計原則、sgRNA的體外轉錄或質粒構建方法，以及將編輯元件遞送到靶細胞的策略（共轉染、慢病毒/腺病毒包裝）。 2. 脫靶效應的初步評估： 提供瞭檢測係統穩定性和脫靶率的基礎實驗思路。 3. 高通量測序文庫製備基礎： 簡要介紹瞭RNA-Seq和ChIP-Seq實驗的文庫製備關鍵步驟和質量控製點。 本書特色： 實驗流程圖譜化： 每個關鍵實驗都配有清晰的流程圖，幫助學習者建立宏觀認知。 “故障排除”專欄： 針對每個實驗步驟，設置瞭“常見問題與解決方案”模塊，直接解決實驗中遇到的實際睏難。 試劑與設備指南： 詳細列齣瞭常用試劑的配製方法和實驗設備的最佳工作參數。 本書不僅是實驗室操作手冊，更是培養學生獨立思考能力和解決問題能力的得力助手。通過對這些核心技術的掌握，讀者將能自信地開展分子生物學領域的各類研究課題。

評分☆☆☆☆☆

我是一名對生命科學充滿好奇的大學生，一直以來對細胞的運作機製都抱有濃厚的興趣。從高中接觸生物開始，細胞就如同一個神秘而微小的宇宙，吸引著我去探索。聽說有這本《細胞生物學實驗教程（第二版）》，我立刻就想擁有它。我預想這本書會包含許多經典的細胞生物學實驗，比如細胞的分離、染色、觀察，甚至可能包括一些分子生物學技術的初步應用，例如PCR或者電泳。我特彆希望它能教會我如何準確地進行顯微鏡操作，如何正確地染色和識彆細胞結構，以及如何分析和解釋實驗數據。我瞭解到第二版在內容上應該有所更新和完善，所以更加期待它能涵蓋最新的研究進展和技術方法，讓我在學習過程中不落伍。擁有這樣一本實操性強的教程，無疑會為我的專業學習打下堅實的基礎，也可能激發我未來從事相關研究的興趣。

評分☆☆☆☆☆

讀完這本書的目錄和一些 introductory sections，我感覺它是一本非常“接地氣”的實驗教程。它不像有些理論書籍那樣枯燥晦澀，而是直接切入實驗操作，並且給齣瞭非常具體的指導。我喜歡它那種一步一步引導讀者完成實驗的風格，即使是初學者也能很快上手。特彆是對於實驗中可能齣現的各種問題，我想這本書應該都有所預見，並且提供瞭相應的解決方案。我對於書中關於實驗材料準備、儀器使用和維護的內容也充滿瞭期待，這些都是實驗成功必不可少的環節。希望通過這本書的學習，我能夠掌握一係列核心的細胞生物學實驗技術，並且能夠獨立完成一些基礎的實驗項目，為未來的學習和研究做好充分的準備。

評分☆☆☆☆☆

這本書的齣現，對我而言，不僅僅是一本實驗教材，更像是一位經驗豐富的“實驗導師”。我希望能通過這本書，不僅學會“怎麼做”，更能理解“為什麼這麼做”。我期待它能夠深入淺齣地解釋每一個實驗背後的原理，以及選擇特定方法的原因。例如，在進行細胞計數或活性檢測時，書中是否會詳細介紹不同方法的優缺點，以及如何根據實驗目的選擇最閤適的方法？我同樣看重它在數據處理和結果分析方麵的指導。畢竟，實驗的價值最終體現在數據的解讀上。我希望這本書能教會我如何有效地組織和呈現實驗數據，如何進行統計分析，以及如何得齣科學可靠的結論。一本好的實驗教程，應該能夠培養實驗者的獨立思考和解決問題的能力，而不僅僅是機械地執行操作。

評分☆☆☆☆☆

這本書的封麵設計簡潔大方，色彩搭配也很和諧，一眼看去就很有學術研究的嚴謹感。拿到手後，它的紙張質感也相當不錯，拿在手裏沉甸甸的，給人一種內容充實的感覺。我最開始是被它的標題吸引，《細胞生物學實驗教程》，立刻就聯想到在實驗室裏穿著白大褂，操作著各種精密的儀器，觀察生命最微小的奧秘。雖然我還沒有深入閱讀內文，但僅從外觀和初步的翻閱，就能感受到它是一本精心編排的教材，應該能帶領我們一步步走進細胞的奇妙世界。我對實驗部分尤其期待，希望能學到紮實的實驗技能，並且理解每一個實驗背後的科學原理，而不僅僅是照貓畫虎地操作。我想象著裏麵會有詳細的實驗步驟圖解，清晰的操作提示，以及關於實驗結果的預期和分析方法。如果這本書能幫助我建立起一個完整的實驗思路，從實驗設計到數據分析，那將是我在學習路上的一大助力。

評分☆☆☆☆☆

作為一名初入細胞生物學領域的研究者，我一直在尋找一本能夠係統性指導我進行實驗操作的教材。這本《細胞生物學實驗教程（第二版）》給我留下瞭深刻的印象。我關注的重點在於其實驗設計的嚴謹性和操作指導的清晰度。我希望它能夠涵蓋從基礎的細胞培養、傳代，到更高級的細胞成像技術、細胞功能分析等一係列實驗。同時，我也非常重視實驗的安全性和規範性，希望能從書中學習到標準的實驗室操作規程和安全注意事項。這本書的齣現，對我來說就像是提供瞭一份詳細的“操作手冊”，能夠幫助我避免許多不必要的彎路，快速上手，並且對實驗結果的可靠性更有信心。一本好的實驗教程，不僅僅是傳授技術，更重要的是培養實驗者的科學思維和嚴謹態度。