分子生物學實驗技術——基礎與拓展 下載 mobi epub pdf 電子書 2025

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黃立華 等 著

圖書標籤:

• 分子生物學
• 實驗技術
• 生物技術
• 生命科學
• 實驗指導
• 高等教育
• 科研
• 生物化學
• 基因工程
• 醫學

齣版社： 科學齣版社

ISBN：9787030550583

版次：31

商品編碼：12252729

包裝：平裝

叢書名： 生命科學實驗指南係列

開本：32開

齣版時間：2017-12-01

頁數：128

正文語種：中文

內容簡介

　　本書由兩部分組成。第一部分“基礎篇”精選瞭10個*基礎的分子生物學實驗和一個綜閤實驗，包括PCR、DNA提取、酶切、連接、轉化、蛋白質電泳等。在每一個實驗的*後，都增加瞭相關的拓展環節，用於拓寬學生對該知識點的理解。第二部分“拓展篇”主要適用於具有一定基礎的科研工作者（研究生或研發人員）進一步深入開展研究，內容包括總RNA提取、實時定量PCR、基因定點突變、熱不對稱交錯PCR、蛋白質原核錶達、蛋白質印跡、凝膠遷移實驗、多剋隆抗體製備、植物轉基因操作和昆蟲轉基因操作等。

目錄

第一部分 基礎篇
實驗1 移液器的使用
實驗2 聚閤酶鏈反應
實驗3 PCR産物的迴收與純化
實驗4 基因組DNA的提取
實驗5 瓊脂糖凝膠電泳
實驗6 質粒DNA的提取
實驗7 DNA酶切與連接反應
實驗8 大腸杆菌感受態細胞的製備與轉化
實驗9 SDS-PAGE
實驗10 錶達蛋白的分離與純化
實驗11 綜閤實驗——基因剋隆
案例分析

第二部分 拓展篇
實驗1 總RNA提取
實驗2 實時定量PCR
實驗3 基因定點突變——overlapPCR
實驗4 熱不對稱交錯PCR
實驗5 蛋白質原核錶達
實驗6 蛋白質印跡
實驗7 凝膠遷移實驗
實驗8 多剋隆抗體製備
實驗9 植物轉基因操作
實驗10 昆蟲轉基因操作
附錄
附錄1 常用培養基和抗生素
附錄2 常用試劑的配製
附錄3 引物設計
附錄4 推薦閱讀書目

現代分子生物學研究前沿進展與應用 一本深入探討當代分子生物學核心技術、最新研究動態及其在生命科學、生物醫學領域廣泛應用的權威參考書。 本書旨在為生命科學領域的科研工作者、高等院校師生以及生物技術行業專業人士提供一個全麵、深入且與時俱進的知識框架，聚焦於當前最尖端、最具革命性的分子生物學技術及其在解決復雜生命現象和疾病機製中的實際應用。我們避開瞭基礎實驗操作的重復性敘述，轉而聚焦於那些推動學科邊界拓展的關鍵性技術平颱、創新的數據解析方法以及學科交叉的前沿課題。 第一部分：基因組學與錶觀遺傳學的深度解析 本部分著眼於超越傳統基因測序範疇的復雜基因組學研究。 1. 單細胞多組學整閤分析 (Single-Cell Multi-Omics Integration): 我們詳細闡述瞭單細胞RNA測序（scRNA-seq）、單細胞ATAC測序（scATAC-seq）和單細胞ChIP測序（scChIP-seq）等技術的最新迭代。重點討論瞭如何有效地整閤來自同一細胞的不同組學數據，例如，如何通過計算方法將基因錶達譜與染色質可及性數據進行配對分析，以揭示細胞異質性背後隱藏的轉錄調控機製。內容涵蓋先進的配對技術（如10x Genomics V(D)J/Feature Barcoding係統）的優化策略，以及處理高維度、稀疏數據的生物信息學流程，例如基於深度學習的細胞類型鑒定和軌跡推斷算法（如Monocle 3, PAGA的最新進展）。 2. 空間轉錄組學與活細胞成像 (Spatial Transcriptomics and Live-Cell Imaging): 本章深入剖析瞭將基因錶達信息與組織微環境精確關聯的空間轉錄組技術（如Visium, MERFISH, seqFISH+）。討論瞭空間解析度的突破，從組織級彆到亞細胞級彆的精確定位策略，及其在腫瘤微環境異質性分析和胚胎發育空間布局研究中的決定性作用。此外，我們探討瞭高分辨率、低光毒性的活細胞成像技術（如STORM/PALM的改進，和光片顯微鏡在三維組織中的應用），著重於如何通過熒光探針設計實時追蹤蛋白質的動態相互作用和核酸的結構變化。 3. 全基因組關聯與功能性驗證 (Genome-Wide Association and Functional Validation): 超越傳統的GWAS結果羅列，本部分聚焦於如何將關聯信號轉化為功能性理解。詳細介紹瞭利用CRISPR/Cas9係統進行大規模非編碼區突變的功能篩選，特彆是利用CRISPRi/a係統進行基因調控元件的精細激活與抑製。討論瞭新型堿基編輯（Base Editing）和先導編輯（Prime Editing）技術在修正緻病性點突變方麵的精確性和脫靶控製策略，以及它們在疾病模型建立中的應用。 第二部分：蛋白質組學、代謝組學與結構生物學的交匯 本部分關注生命活動核心執行者——蛋白質及其相互作用網絡的解析。 4. 高級蛋白質組學與翻譯後修飾 (Advanced Proteomics and Post-Translational Modifications, PTMs): 本書詳細介紹瞭基於高分辨質譜（HRMS）的蛋白質組學技術在深入解析PTMs方麵的最新進展，特彆是針對泛素化、磷酸化和糖基化的高靈敏度識彆方法。重點討論瞭基於化學標簽（如TMT, iTRAQ）的定量策略在復雜樣品（如臨床樣本）中的應用優化，以及蛋白質-蛋白質相互作用組（PPI）研究中親和純化-質譜聯用（AP-MS）技術的流程標準化和數據可靠性評估。 5. 結構生物學的革命：冷凍電鏡 (Cryo-Electron Microscopy, Cryo-EM): 冷凍電鏡技術已經成為解析大分子復閤物結構的主流手段。本章深入探討瞭亞納米分辨率下獲取高精度三維結構的流程優化，包括高速數據采集、圖像處理中的增強數據分類算法（如Huber的分類方法），以及如何利用混閤模型來解析具有高動態或多構象態的分子機器。我們還將結構生物學與功能生物學相結閤，討論如何利用結構信息指導藥物靶點設計。 6. 細胞內生物傳感與蛋白質追蹤 (Intracellular Biosensors and Protein Tracking): 介紹新一代基於熒光共振能量轉移（FRET）或分子感應器（Biosensors）的工具，它們能夠在活細胞內實時監測特定信號分子（如第二信使、離子濃度）的動態變化，以及蛋白質的亞細胞定位和濃度波動。重點闡述瞭設計高特異性、高靈敏度感應器的化學閤成策略，以及如何利用這些工具來剖析信號轉導通路中的時空調控。 第三部分：生物信息學、人工智能與係統生物學 生命科學數據爆炸式增長要求更強大的計算和模型化能力。 7. 深度學習在生物學中的應用前沿 (Frontier Applications of Deep Learning in Biology): 本章超越基礎的機器學習分類器，聚焦於深度學習在解決復雜生物學問題中的突破。涵蓋利用捲積神經網絡（CNNs）和循環神經網絡（RNNs）進行蛋白質結構預測（如AlphaFold的後續優化與局限性分析）、基因調控網絡建模、以及從醫學影像中自動提取生物標誌物的能力。討論瞭可解釋性AI（Explainable AI, XAI）在生物學模型中的必要性。 8. 係統生物學與定量代謝流分析 (Systems Biology and Quantitative Flux Analysis): 探討如何利用代謝組學數據結閤同位素示蹤技術，對細胞或組織水平的代謝網絡進行量化分析。詳細介紹瞭約束代謝模型（Constraint-Based Reconstruction and Analysis, COBRA）的構建與應用，特彆是如何將基因錶達數據和代謝網絡拓撲結構相結閤，以預測細胞對環境變化的生理響應，這在閤成生物學和代謝工程中具有核心價值。 9. 高通量錶型組學與藥物發現 (High-Throughput Phenomics and Drug Discovery): 本書介紹瞭利用自動化高內涵篩選（High-Content Screening, HCS）平颱，結閤圖像分析和生物信息學，實現對細胞錶型進行高維度、無偏倚描述的方法。重點討論瞭利用CRISPR文庫篩選發現新的藥物靶點和作用機製的策略，以及如何利用這些大規模錶型數據來識彆具有特定生物學特徵的化閤物。 本書強調跨學科整閤和解決實際科學問題的能力培養，內容麵嚮當前正在積極開發和應用中的尖端技術，而非對已成熟技術的重復描述。其深度和廣度旨在推動讀者從技術操作者提升為創新研究的設計者。

評分☆☆☆☆☆

一本關於分子生物學實驗技術的書籍，自然少不瞭對各種關鍵儀器的介紹。我個人對那些在實驗室裏閃爍著各種指示燈、發齣復雜聲音的精密儀器感到著迷。比如，離心機是如何工作的？不同轉速和時間的設置會帶來什麼影響？PCR儀又是如何精準地控製溫度循環的？還有那些用於檢測的熒光顯微鏡，它們又是如何捕捉到微觀世界的色彩呢？我特彆希望書中能夠詳細介紹這些常用儀器的操作規範、維護保養以及常見故障排除。畢竟，儀器的正確使用和維護，直接關係到實驗的穩定性和數據的可靠性。此外，我還在思考，這本書會不會涉及到一些特殊的實驗環境或者條件的要求？比如，無菌操作的重要性，或者在進行某些敏感實驗時需要注意的溫度、濕度等環境因素。如果能有一些關於實驗室安全規範的提及，那就更加全麵瞭。畢竟，在進行實驗操作時，安全永遠是第一位的。

評分☆☆☆☆☆

我正在尋找一本能夠係統性地梳理分子生物學實驗技術脈絡的書籍，我的期待是它能夠像一本詳盡的操作手冊，又具備一定的理論深度。我希望它能夠詳細介紹從樣本采集、處理，到各種分子操作，再到結果分析的全過程。比如，在提取DNA或RNA時，如何選擇閤適的裂解液和純化方法？在進行DNA瓊脂糖凝膠電泳時，如何根據DNA片段大小選擇閤適的凝膠濃度和電泳緩衝液？Western Blot實驗中，如何選擇特異性好的抗體，以及如何優化顯影條件？我對於這些細節的講解非常看重，因為在實際操作中，很多問題都齣在這些看似不起眼的環節。另外，我也希望書中能提供一些常用的實驗方案，並且對這些方案進行詳細的解釋，說明每一步的原理和目的，以及可能遇到的問題和解決方案。這種“手把手”的教學模式，對我這種希望快速上手實踐的讀者來說，是極具價值的。

評分☆☆☆☆☆

這本書的書名聽起來就很吸引人，"分子生物學實驗技術——基礎與拓展"，這兩個詞“基礎”和“拓展”就暗示瞭它可能不僅僅是停留在最入門的層麵，而是能帶領讀者深入到更廣闊的領域。我一直對分子生物學中的一些前沿技術，比如CRISPR-Cas9基因編輯技術，或者單細胞測序技術，充滿瞭好奇。這些技術是如何實現的？它們在解決生物學問題上又有哪些突破性的應用？我希望這本書不僅僅停留在講述DNA提取、PCR擴增這些基礎操作，而是能夠觸及到更現代、更復雜的實驗體係，比如基因功能研究的各種方法，蛋白質相互作用的檢測技術，或者在細胞成像方麵的進展。如果書中能介紹一些最新的研究案例，通過這些案例來講解技術如何應用於解決實際的科學問題，那將極大地激發我的學習興趣。同時，"拓展"也意味著它可能包含瞭對一些交叉學科技術的介紹，比如生物信息學在分子生物學研究中的應用，或者一些工程學在分子生物學工具開發中的作用。這種跨領域的視角，往往能帶來全新的思考和啓發。

評分☆☆☆☆☆

一本關於分子生物學實驗技術的書，聽起來就很實用！我一直覺得分子生物學是個非常迷人的領域，那些精密的DNA、RNA、蛋白質相互作用，構建齣生命最基本的運行機製，簡直就是微觀世界的奇跡。想象一下，我們能夠通過各種精巧的實驗手段，去“看到”這些看不見的分子在細胞裏忙碌，去理解它們的語言，甚至去乾預它們的行為，這本身就充滿瞭探索的樂趣。我特彆好奇書中會如何介紹那些經典的分子生物學實驗，比如PCR、凝膠電泳、Western Blot，這些詞匯聽起來就充滿瞭科技感，它們是如何一步步發展起來的，又是如何成為現代生物學研究的基石呢？我希望書中不僅會講解原理，更能深入剖析每一個步驟的操作要領，甚至是實驗中可能遇到的各種“坑”以及如何規避，這樣對於初學者來說，無疑是寶貴的經驗總結。畢竟，理論知識再紮實，動手能力纔是關鍵，而實驗的成功與否，往往就取決於那些看似微不足道的細節。如果書中能配上清晰的流程圖或者示意圖，那就更好瞭，這樣可以幫助我們更直觀地理解復雜的實驗過程，減少走彎路的可能性。

評分☆☆☆☆☆

我對分子生物學實驗技術的學習，更多的是齣於對生命奧秘的好奇心，以及希望能夠掌握一些能夠“動手”去探索這些奧秘的工具。我希望這本書能提供一種循序漸進的學習路徑，從最基礎的概念講起，逐步深入到更復雜的實驗技術。比如，它會不會介紹如何設計一個閤理的實驗？如何從研究問題齣發，選擇最適閤的技術手段？在實驗過程中，如何進行對照組的設置，以及如何確保實驗的可重復性？我對於數據分析和結果解讀的部分也格外感興趣。在獲得瞭一係列實驗數據後，如何對其進行科學的分析和判斷？如何避免過度解讀或者誤讀數據？如果書中能提供一些關於數據統計分析的基本方法，或者介紹一些常用的生物信息學分析工具，那將是非常有益的。總而言之，我期待的不僅僅是技術的羅列，而是對整個科學研究過程的理解和實踐能力的提升。