內容簡介
《實用流式細胞術:血液病篇》以2008版WHO血液和淋巴組織腫瘤分類為框架,對以下幾個方麵進行瞭重點闡述:利用多色流式細胞術進行急性白血病、骨髓增生異常綜閤徵、骨髓增殖性腫瘤和淋巴係統腫瘤的免疫分型。結閤目前微量殘留病水平對於評估白血病患者預後、進行危險度分層,指導個體化治療的新策略的需要,詳細講解瞭微量殘留病的檢測原則、抗體組閤、檢測方法及臨床意義。流式細胞術在造血乾細胞移植、紅細胞病、血小闆檢測和免疫功能檢測中的應用。流式細胞儀的工作原理、標本製備、相關的儀器操作及常用的抗體、抗體組閤、免疫分型報告的標準化和國際上的相關指南。《實用流式細胞術:血液病篇》內容涉及理論和實際操作,書中配以大量流式細胞分析圖和細胞形態學圖片,有助於讀者的理解和掌握。不僅適用於從事流式細胞術使用和分析的人員及臨床醫生,而且對臨床醫學院校師生和研究人員均有參考價值。
目錄
第一章 流式細胞儀的工作原理(吳煦 楊海霞)
第一節 流式細胞儀的發展史
第二節 流式細胞儀的基本原理
第三節 流式細胞儀的結構組成
一、激光及光束成形係統
二、液流係統
三、流式細胞儀中的光信號收集係統
四、電子係統
五、FCM測量數據的存貯、顯示與分析
第四節 流式細胞儀的檢測信號及意義
一、散射光信號的檢測
二、熒光信號的檢測
第五節 流式細胞儀的主要分析技術指標
一、熒光靈敏度
二、儀器分辨率
三、前嚮散射光靈敏度
四、細胞分析速度
第六節 細胞分選
一、電荷式細胞分選
二、捕獲管分選
三、FCM分選指標
第七節 高端流式細胞儀的簡介和展望
一、FACSCantoⅡ流式細胞儀
二、LSRⅡ高端生命科學研究型流式細胞儀
三、FACSAriaⅡ高速流式細胞分選儀
四、Influx高端流式細胞分選儀
五、MACSQuantTM流式細胞儀——細胞分析的裏程碑
第二章 流式細胞儀的標本製備、檢測及質量控製(王亞哲)
第一節 標本的製備及保存
一、標本的準備
二、細胞計數
三、熒光染色
四、質量控製
第二節 熒光素的特性及應用
一、常用熒光素的主要特點
二、熒光素的選擇和搭配
第三節 儀器調整及數據獲取
一、儀器的校準和調整
二、流式細胞儀測定及數據獲取
第四節 數據分析和報告
一、數據分析
二、數據解釋及報告
第三章 正常血細胞發育過程的抗原錶達規律(劉艷榮)
第一節 正常髓細胞係抗原的錶達規律
一、正常粒係和單核細胞係抗原的錶達規律
二、正常紅係細胞的分化規律
三、正常巨核細胞分化發育的抗原錶達規律
第二節 正常淋巴細胞分化發育的抗原錶達規律
一、正常B細胞抗原的錶達規律
二、正常T細胞抗原的錶達規律
第四章 急性白血病的免疫錶型(劉艷榮 袁婷婷)
第一節 急性白血病的診斷與分型
一、白血病的概念
二、急性白血病的FAB分型
三、急性白血病的MIC分型
四、急性白血病1999版WHO分類
五、2008版WHO血液/淋巴係統腫瘤分類
六、2008版與1999版WHO分類申體係和淋巴係腫瘤分類的比較
第二節 急性髓細胞白血病的免疫錶型分析
一、AML胖重現性的遺傳學異常
二、AML無其他特異性異常(NOS)
第三節 急性淋巴細胞白血病的免疫錶型分析
一、B淋巴母細胞白血病/淋巴瘤
二、B淋母細胞白血病/淋巴瘤伴重現性的遺傳學異常
三、T淋巴母細胞白血病/淋巴瘤
第四節 急性係列不明型白血病的免疫錶型
一、急性未分化型白血病
二、混閤錶型急性白血病伴t(9;22)(q34;q11.2);BCR-ABL1
三、混閤錶型急性白血病伴t(V;11q23);MLL重排
四、混閤錶型急性白血病,B/髓,NOS
五、混閤錶型急性白血病,T/髓,NOS
六、混閤錶型急性白血病,NOS-罕見類型
七、其他混閤錶型急性白血病
第五章 髓細胞增殖性疾病的免疫錶型分析(劉艷榮 徐娟 萬歲桂)
第一節 2008版WHOX寸髓細胞增殖性疾病的分類
一、骨髓增殖性腫瘤
二、骨髓增生異常/骨髓增殖性腫瘤(MDS/MPN)
三、骨髓增生異常綜閤徵(MDS)
第二節 骨髓增殖性腫瘤
一、慢性粒細胞白血病,BCR-ABL1陽性
二、慢性嗜酸性粒細胞白血病,NOS
三、肥大細胞增多癥
四、骨髓增殖性腫瘤,未分類
第三節 骨髓增生異常/骨髓增殖性腫瘤
一、慢性粒單細胞白血病
二、非典型慢性粒細胞白血病,BCR-ABL1陰性
三、幼年型粒單細胞白血病
四、骨髓增生異常/骨髓增殖性腫瘤,未分類
第四節 骨髓增生異常綜閤徵
一、概述
二、MDS的細胞錶麵標記
三、MDS異常結果的判斷
四、質量控製
五、結論
第六章 流式細胞術在淋巴增殖性腫瘤中的應用(硃煥玲)
第一節 概述
一、正常外周血及骨髓標本
二、良性/反應性實體淋巴組織(淋巴結、扁桃體)
第二節 成熟B細胞腫瘤
一、概述
二、FCM在成熟B淋巴細胞腫瘤中的作用
三、2008版WHO分類B淋巴細胞增殖性腫瘤的免疫分析
第三節 成熟T/NK細胞腫瘤
一、概述
二、常見的T/NK細胞腫瘤
第四節 病例分析
一、多發性骨髓瘤
二、脾邊緣帶淋巴瘤
三、毛細胞白血病
四、套細胞淋巴瘤
五、彌漫大B細胞淋巴瘤
六、T大顆粒細胞白血病
七、NK白血病/淋巴瘤
八、血管免疫母細胞性T細胞淋巴瘤
九、間變大細胞淋巴瘤
十、肝脾T細胞淋巴瘤
第七章 慢性淋巴細胞白血病和多發性骨髓瘤的免疫錶型特點(李建勇 王亞哲)
第一節 慢性淋巴細胞白血病
一、概述
二、CLL的免疫錶型特點
三、FCM檢測CLL的預後指標
四、單剋隆B淋巴細胞增多癥
五、鑒彆診斷
第二節 多發陸骨髓瘤
一、區分正常和異常漿細胞的抗原
二、骨髓瘤細胞的設門分析
三、多發性骨髓瘤的抗原錶達
四、免疫錶型與預後
五、免疫分型與靶嚮治療
六、用於多發性骨髓瘤免疫錶型分析的抗體組閤
第八章 急性白血病微量殘留病的流式細胞術檢測(劉艷榮)
第一節 概述
一、微量殘留病檢測的理由
二、微量殘留病檢測的方法
三、白血病相關的免疫錶型特點
第二節 急性淋巴細胞白血病殘存白血病檢測
一、B係-ALL的殘存白血病檢測
二、T係-ALL的殘存白血病檢測
三、ALL微量殘留病檢測的臨床意義
四、ALL微量殘留病檢測申FCM與PCR方法的比較
第三節 急性髓細胞白血病微量殘留病檢測
一、正常體係祖細胞的抗原錶達特點
二、AML微量殘留病檢測的抗體組閤和LAIP特點
三、AML微量殘留病檢測的臨床意義
四、AML微量殘留病檢測中FCM與PCR的比較
第九章 慢性淋巴細胞增殖性疾病的微量殘留病檢測(王亞哲)
第一節 慢性淋巴細胞白血病
一、CLL的微量殘留病檢測
……
第十章 流式細胞術分析造血乾細胞
第十一章 流式細胞術在造血乾細胞移植中的應用
第十二章 常見紅細胞病的流式分析
第十三章 流式細胞術與血小闆分析
第十四章 免疫功能檢測
第十五章 免疫分型的抗體組閤原則及報告標準化
附錄
精彩書摘
流式細胞儀安裝有一根或多根激光器,一些低端的流式細胞儀還采用汞光燈作為光源。絕大多數流式細胞儀都配有氬離子氣態激光器作為第一根激光,其發射波長為488nm。待測樣本中的細胞經液流係統傳送,形成單細胞流,依次通過流式細胞儀的流動室,在激光照射區域,細胞上標記的熒光染料受到激光的激發,産生熒光信號。在不同的實驗體係中,根據細胞標記的熒光素不同,在不同波長的激光激發下,發射齣不同波長的熒光,這些熒光信號可以反映不同的細胞生物學特性。細胞受到激光照射後産生的這些光信號被相應接收器(光電倍增管)接收並放大,轉換為與光強度相關的電子信號,然後經計算機儲存和處理分析,以圖形形式(如直方圖、點圖、密度圖等)直觀地顯示齣細胞的分布情況。流式細胞儀産生的信號主要有散射光信號和熒光信號。這些信號可以反映相應的細胞特徵,如反映細胞相對大小的前嚮散射光(FSC)、反映細胞內部復雜程度的側嚮散射光(SSC)以及反映各種細胞功能和抗原錶達的熒光信號。將圖形和數據直接輸入聯機專用的計算機,或存人磁盤以備分析。計算機快速而精確地將所測數據進行統計計算,結閤多參數分析,從而實現瞭細胞定量分析。
一些流式細胞儀還配有細胞分選係統,通過細胞分選係統,還可以將具有相同光信號特徵,即某些特定特徵的細胞群體分選齣來。
前言/序言
流式細胞術作為一種高科技、敏感而快速分析細胞及微粒的技術,自中國引進第一颱流式細胞儀以來,已經走過30餘年的曆程。在這期間,隨著流式細胞儀結構和功能的改進和提高,流式細胞儀的應用範圍越來越廣,目前國內已經有越來越多的醫療和研究機構擁有瞭流式細胞儀。流式細胞儀在血液學、免疫學、腫瘤、乾細胞和細胞治療等領域發揮著重要的作用。
流式細胞術在血液學中的應用是一個極好的範例,其中對血液淋巴係統腫瘤的診斷、分期和療效的評定已經成為不可缺少的依據。流式免疫分型的應用使白血病和淋巴瘤的診斷進入一個嶄新的階段,使得形態學不典型、診斷分型睏難疾病的診斷變得容易瞭,而且還發現瞭一些形態學不能診斷的疾病。對目前診斷睏難的骨髓增生異常綜閤徵,免疫錶型在診斷中的作用也凸顯齣來,其意義會越來越明確。由於血液係統疾病的復雜性,使得流式細胞術在血液病中的應用掌握起來比較睏難,問題較多。本書針對這些問題進行瞭係統和詳細的介紹。並針對目前免疫分型抗體使用不規範、報告形式混亂等問題介紹瞭國際上的先進經驗、指南及編者的實際範例。
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