編輯推薦
聚焦生命科學、醫學研究中絕對能用到的實驗技巧和成功案例,讓新手快速掌握生命科學和醫學研究中的質譜分析實驗技巧。
內容簡介
《質譜分析實驗指南》的目的是使質譜技術能夠靈活應用於生命科學,明確質譜技術能夠做什麼?為此,作者主要從技術和方法層麵入手,圖文並茂,顯淺易明,通俗易懂。從儀器選擇,樣品製備,技術路綫,到分析方法要點,進行瞭詳細的介紹。首先,一是采用質譜分析技術"發現"未知因子,包括配體結閤蛋白的發現,翻譯後修飾蛋白的檢齣和鑒定,産生變化蛋白的發現,疾病生物標誌物的發現;采用CE/MS技術發現抑鬱癥血液生物標誌物為實例。微生物菌種的快速鑒定等。二是采用質譜分析技術"定量"已知因子,包括檢測氨基酸 通過血漿遊離氨基酸輪廓早期發現癌癥的方法,檢測酸性磷脂,檢測小RNA,檢測氣體分子;以硫醇為探針檢測H2S及其定量,檢測細胞的能量代謝;低氧環境下代謝物的定量,檢測細胞的氧化應急;以親電子化閤物8-nitro-cGMP定量為實例,檢測蛋白質的"結構變化"等。三是采用質譜成像技術對組織/細胞"可視化",包括細胞的"能量代謝"成像,在慢性炎癥組織中的磷脂分子成像,"藥物動態"成像,細胞 亞細胞結構的代謝伴隨著細胞動態的觀察等。通過基礎篇和實踐篇的對應關係,完成從基礎理論到實際應用的過程,也完成瞭對MS這個復雜高端儀器的廣泛普及應用過程。
作者簡介
譯者蒲小平,教授,女,北京大學藥學院分子與細胞藥理學係教授(2002年7月),博士生導師(2005年1月)。005年獲教育部提名國傢科學技術奬自然科學一等奬一項。2000-2009年,主持完成瞭國傢自然科學基金課題二項、作為項目骨乾完成瞭973項目兩項。
目錄
◆前言 杉浦悠毅
◆ 本書的構成 5
基本篇 —原理和基礎知識—
1 生命科學研究中質譜分析應用方法 杉浦悠毅 2
2 掌握MS實驗的具體框架 杉浦悠毅 10
3 “發現”質譜分析 定性MS的基礎和原理 杉浦悠毅,新間秀一 18
4 “測定”質譜分析 定量MS的基礎和原理 杉浦悠毅,新間秀一 29
5 “成像”質譜分析 質譜成像的基礎和原理 杉浦悠毅,新間秀一 37
實踐篇 —以實驗方法為中心—
第Ⅰ章 用質譜分析“發現”未知因子
1 發現配體結閤蛋白質 加部泰明,末鬆 誠,半田 宏 48
2 翻譯後修飾的檢測與鑒定 以微管蛋白翻譯後修飾新發現為例
池上浩司,新間秀 一,瀨藤光利 59
3 探知錶達變化的蛋白質 以新蛋白質組學的絕對定量為例
鬆本雅記,中山敬一 71
4 發現疾病生物標誌物 以CE/MS發現重癥抑鬱障礙血液生物標誌物為例
藤森玉輝,大橋由明,川村則行 81
5 迅速鑒定微生物種類 鬆山由美子,工藤壽治,川口壽太郎,韮澤 崇 89
第Ⅱ章 用質譜分析“測定”已知因子
6 測定氨基酸 依據PFAA錶達譜的癌癥早期發現方法 今泉 明,吉田寬郎 98
7 測定酸性溶血磷脂 中西廣樹 106
8 測定miRNA 阪口裕理子,鈴木 勉 112
9 測定氣體分子 使用硫醇探針對H2S進行定量 菱木貴子 120
10 測定細胞能量代謝 缺氧環境下代謝通量的定量 南嶋洋司 132
11 測定細胞氧化應激 以親電子化閤物8-nitro-cGMP的定量為例
澤 智裕,居原 秀,赤池孝章 139
12 測定蛋白質的“結構變化” 山本龍也 147
第Ⅲ章 用質譜分析“成像”
13 細胞“能量代謝”成像 杉浦悠毅,梶村真弓 157
14 慢性炎癥組織中溶血磷脂成像 杉浦悠毅,花田 充,本多久樂樂 170
15 “藥物代謝動力學”成像 新間秀一,濱田哲暢 180
主導方案 選擇最重要的實驗步驟進行說明
·用Nano LC/ESI-MS係統進行MS測定、數據庫檢索的詳細步驟 解說:山本龍也
·用雙嚮電泳進行蛋白質分離、凝膠內消化的詳細步驟 解說:新間秀一
· 采用三重四級杆LC/MS/MS係統MRM法分子定量的詳細步驟 解說:中西 豪
·質譜成像中組織切片樣品製備、MS測定的詳細步驟 解說:杉浦悠毅
第IV章 質譜分析研究策略
16 嚮著代謝係統生物學的新理解邁進
末鬆 誠,大村光代,森川隆之,笠原正貴,久保亞紀子,南嶋洋司,梶村真弓 191
結束寄語——寫給即將踏上質譜分析之旅的各位朋友 末鬆 誠 203
附錄
1.為初學者準備的質譜分析專業用語集 206
2.適閤各實驗目的的質譜儀種類簡介 208
◆ 索引 212
專欄 —前沿應用介紹— 杉浦悠毅
·領域改變,質量也會發生變化 46
·不同領域裝置的融閤 用質譜流式細胞儀進行多重抗體標記和細胞分析 97
·金屬元素分布的質譜成像 189
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