内容简介
《精编分子生物学实验技术(研究生本科生教学用书)》共二十章:第一章到第十三章介绍分子生物学常用实验技术;第十四章到第十七章着重阐述分子生物学相关的细胞、组织和动物实验;第十八章为分子生物学常用数据库;第十九章为计算机模拟小分子药物设计;第二十章阐述了分子生物学实验的设计和统计分析方法。
《精编分子生物学实验技术(研究生本科生教学用书)》从初学者的角度出发,符合初学者的需要,也可为从事基础医学研究的人员提供帮助。
作者简介
李燕,女,中国人民解放军空军军医大学(第四军医大学)生物化学与分子生物学教研室副教授。中国生物化学与分子生物学会会员,中国神经科学学会会员;获评陕西省青年科技新星和原总后勤部优秀青年科技人才扶持对象;享受陕西省三秦人才津贴和军队优秀专业技术人才岗位津贴。从事医学本科生和研究生教学工作14年。主编专著3部,参编教材5部。近年来发表SCI收录科技论文27篇,发表教学论文6篇,主持国家自然科学基金3项,获国家专利授权2项。
目录
第一章 PCR技术
第一节 RT-PCR
第二节 实时定量PCR
第二章 RNA干扰技术
第三章 MicroRNA研究方法
第四章 长链非编码RNA研究方法
第一节 长链非编码RNA概述
第二节 RNA pull-down鉴定RNA-蛋白质相互结合
第三节 RNA免疫共沉淀技术
第五章 CRISPR/Cas9基因编辑技术
第一节 SgRNA的设计及打靶效应分析
第二节 受精卵注射CRISPR/Cas9系统制备基因编辑动物
第六章 重组DNA技术
第一节 大肠杆菌感受态细胞的制备
第二节 质粒DNA的转化
第三节 质粒提取
第四节 琼脂糖凝胶电泳检测DNA
第五节 凝胶回收DNA
第六节 重组DNA的构建
第七节 病毒载体介导的重组DNA技术
复制缺陷型腺病毒载体的包装
慢病毒载体的包装
第八节 目的蛋白的原核表达与分离纯化
目的蛋白的原核诱导表达
目的蛋白的表达检测
菌体的细胞破碎
镍离子亲和层析纯化
DEAE阴离子交换层析
凝胶过滤层析
第七章 Western-blot技术
第一节 蛋白样品制备
第二节 蛋白定量
第三节 SDS-PAGE电泳
第四节 电转移
第五节 酶免疫定位
第八章 蛋白相互作用筛选及验证
第一节 酵母双杂交系统筛选
第二节 免疫共沉淀
第三节 Pull-down实验
第九章 蛋白泛素化检测
第十章 转录调控机制研究
第一节 转录因子与靶基因相关性分析
第二节 靶基因的启动子克隆
第三节 报告基因活性分析
第四节 DNA-转录因子结合分析
第五节 ChIP-Seq技术
第十一章 核酸甲基化分析
第一节 基因组DNA提取
第二节 DNA甲基化分析
第三节 RNA甲基化分析
第十二章 基因表达谱芯片分析
第十三章 蛋白质谱分析
第十四章 细胞代谢研究方法
第一节 基于Seahorse生物能量分析仪测定糖酵解和线粒体有氧代谢的方法
第二节 线粒体呼吸链复合体功能的测定
第十五章 相关细胞学技术
第一节 细胞冻存
第二节 细胞复苏
第三节 细胞计数法测定生长曲线
第四节 MTT法测定细胞增殖
第五节 CCK-8法测定细胞增殖
第六节 BrdU法测定细胞增殖
第七节 平板克隆形成实验
第八节 软琼脂克隆形成实验
第九节 Transwell
第十节 划痕实验
第十一节 细胞周期的测定
第十二节 细胞凋亡检测
第十三节 脂质体介导的质粒转染
第十四节 病毒感染
第十六章 相关组织学技术
第一节 动物组织取材和固定
第二节 临床标本收集方法
第三节 免疫组织(细胞)化学
第四节 间接免疫荧光
第五节 原位杂交技术
第十七章 相关常用动物实验
第一节 裸鼠移植瘤动物模型
第二节 小动物活体成像技术
第十八章 分子生物学常用数据库
第一节 基因基本信息的获取
第二节 基因表达调控分析
第三节 基因功能分析
第十九章 计算机模拟辅助小分子药物设计
第一节 基于药效团模型的虚拟筛选方法
第二节 基于分子对接的虚拟筛选
第三节 骨架迁越
第二十章 常用实验设计和统计方法
第一节 完全随机设计分组
第二节 样本量估计软件实现
第三节 实验原始数据记录及预处理
第四节 统计分析方法的选择
第五节 学术论文设计方法描述
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